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術(shù)中冰凍切片,您了解多少?

 JUN1854 2021-10-27
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什么是冰凍切片呢?

手術(shù)中冰凍切片快速病理檢查(簡稱“冰凍切片”)是將手術(shù)中切下的病變組織在冰凍切片機中 -20℃左右迅速凍成硬塊,然后制成切片經(jīng)染色、封片、等多個環(huán)節(jié)后供顯微鏡下病理檢查,一般要求病理醫(yī)師在30分鐘內(nèi)做出冰凍病理診斷。

冰凍快速檢查是病理科的重要技術(shù)項目,具有高技術(shù)含量、高醫(yī)療風(fēng)險以及低效益回報等特點,其最主要的特點就是及時、快速。

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什么情況需要做冰凍切片呢?

簡單的說,就是外科醫(yī)生希望在手術(shù)過程中馬上了解病變的性質(zhì),以便及時確定手術(shù)范圍,并做出相應(yīng)的處理,病理診斷的結(jié)果直接關(guān)系到手術(shù)臺上患者的下一個治療步驟。如乳腺腫塊切除后的冰凍報告是良性的纖維腺瘤,則可宣告手術(shù)結(jié)束;如報告是乳腺癌,就需要進一步擴大手術(shù)范圍,甚至切除整個乳房及腋窩淋巴結(jié)。這樣患者就可以避免二次麻醉及手術(shù)之苦。

既然冰凍切片檢查如此迅速,是不是所有手術(shù)標(biāo)本都適合做冰凍切片呢?答案是否定的。因為快速冰凍病理診斷不是萬能的,它是一把“雙刃劍”,雖然它及時快速,但由于時間緊迫、送檢標(biāo)本局限性、新鮮標(biāo)本水分對細胞形態(tài)的影響、有些病例需要做進一步檢查(如免疫組化)等因素,導(dǎo)致冰凍病理診斷報告的準確性遠不如常規(guī)石蠟病理診斷報告。因此冰凍檢查只能作為術(shù)中指導(dǎo)手術(shù)方案的參考診斷,最終診斷仍以常規(guī)石蠟病理診斷為準,這就是為什么部分冰凍診斷報告會注明“因冰凍取材有限,具體結(jié)果待石蠟切片及免疫組化進一步確診”的原因。

在實踐工作中,臨床醫(yī)生與病理醫(yī)生需及時溝通,熟悉和了解術(shù)中冰凍的適用、慎用及不宜范圍,可以有助于我們更好地利用和發(fā)揮這項病理技術(shù),為更多患者帶來便捷。


術(shù)中冰凍的適用范圍

擇期手術(shù)時,需要確定病變性質(zhì)(腫瘤/非腫瘤、良性/惡性腫瘤等)以決定手術(shù)方案的標(biāo)本

了解惡性腫瘤的擴散情況,包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等

確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留

切除組織的確認,如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等


術(shù)中冰凍慎用范圍

 涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術(shù)切除標(biāo)本。需要此類手術(shù)治療的患者,其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過常規(guī)活檢確定。


術(shù)中冰凍不適用范圍

疑為惡性淋巴瘤

過小的標(biāo)本(檢查長度≤0.2cm者)

術(shù)前易于進行常規(guī)活檢者。

脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

需要依據(jù)核分裂象計數(shù)判定良、惡性的軟組織腫瘤。

主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。

已知具有傳染性的標(biāo)本(例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等)

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技巧分享

冰凍切片在組織學(xué)技術(shù)中應(yīng)用范圍較廣,對病理學(xué)中的臨床手術(shù)的快速診斷其意義更大,冰凍切片要求的技巧更高,以下分享幾種快速冰凍切片的技巧供大家參考:
1
組織溫度
不同的組織,有不同的溫度要求,各種不同的組織都有其最佳的冰凍切片溫度,如能很好地掌握這些規(guī)律,就可制出優(yōu)良的冰凍切片,如下各種組織冰凍切片要求的溫度只作為參考,實際冰凍切片還需根據(jù)實際情況進行有效的調(diào)整才可切出優(yōu)良完整的切片:

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表1 不同組織冰凍切片溫度參考

2
避免組織發(fā)脆
當(dāng)切片時發(fā)現(xiàn)組織發(fā)脆,一般是組織冷凍過度,可將冰凍組織連同支撐器取出來,在室溫中停留片刻,再進行切片,也可調(diào)高冰凍點。


3
操作方法
冰凍切片的操作方式是利用切片機的防卷板、切制組織片,調(diào)好防卷板,制作冰凍切片,關(guān)鍵在于防卷板的調(diào)節(jié)上,這就要求操作者要細心,準確地將其調(diào)校好,調(diào)正的位置切片時切出組織片能在第一時間順利通過防卷板的通道,平整的平鋪在持刀器的金屬板上,掀開防卷板,用載玻片粘取組織片。

4
多例組織切片
多例多塊組織同時做冰凍切片時,應(yīng)各自放置在不同的支撐器上,放置于冷凍臺進行冷凍處理,然后依據(jù)不同的編號進行寫標(biāo)簽黏附在凍頭上,依次進行切片根據(jù)標(biāo)簽號的編寫載玻片編號,才可以區(qū)分。

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5
載玻片粘貼技巧
① 用于黏附組織片的載玻片,應(yīng)放在常溫的地方,不可放在冷凍室中,這樣可以保持冰凍組織片與載玻片有一定的溫差,利于切片的附貼,防止脫片的概率。
② 載玻片要干凈:保持載玻片干凈,新買的載玻片經(jīng)過正規(guī)洗滌后,在95%的乙醇內(nèi)浸泡2小時,用綢布擦干或紅外線烤箱烤干再使用。
③ 貼片時載玻片與刀面的角度要成30°-45°,依靠載玻片的熱量將組織切片吸上來,迅速抬起,切忌壓片。
6
注意事項
① 防卷板及切片刀和持刀架上的板塊要保持干凈,需經(jīng)常用毛筆掃除切片殘余和用柔軟的紙張擦,有時需要每切完一張切片后就用紙擦一次,因為這個地方是切片通過和附貼的地方,如果有殘余的包埋劑粘于刀和板上,將會破壞甚至撕裂切片,使切片不能完整切出。
② 切片前組織不能經(jīng)任何固定劑浸泡,也不能接觸水分,應(yīng)保持干凈,甚至我們可以用濾紙把組織表面的水分印干,這樣才能最大限度地防止切片產(chǎn)生冰晶。
③ 一次性刀片,要保存在冰凍室內(nèi),便于換刀片時,不至于因刀片溫度過高,一時又難以很快降溫,而影響制片,在準備進行冰凍切片前可提前安裝好刀片使之降溫。
④ 已知具有傳染性的標(biāo)本(例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等),不適宜做冰凍切片,以免影響操作人員健康,冰凍切片結(jié)束后,除機器本身自帶消毒設(shè)備外,也可采用紫外線照射的方法。

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術(shù)中冰凍對醫(yī)生有哪些要求?

快速活檢是臨床醫(yī)師在實施手術(shù)過程中,就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進行的緊急會診,尤其需要臨床醫(yī)師和病理醫(yī)師間的密切合作。


病理醫(yī)師

手術(shù)中快速活檢應(yīng)由經(jīng)驗豐富的兩名主治及以上職稱的病理醫(yī)師完成。負責(zé)快速活檢的主要病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的①臨床情況;②手術(shù)所見;③既往有關(guān)的病理學(xué)檢查。


臨床醫(yī)師

有關(guān)臨床醫(yī)師應(yīng)于手術(shù)前向患者和(或)患者授權(quán)人說明快速活檢的意義和局限性等,取得患者和(或)患方的知情和理解。患者和(或)患者授權(quán)人應(yīng)在由醫(yī)院制定的《手術(shù)中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應(yīng)在手術(shù)前一天向病理科提交快速活檢申請單,填寫患者的病史,重要影像學(xué)、實驗室檢查結(jié)果和提請病理醫(yī)師特別關(guān)照的問題等。盡可能不在手術(shù)進行過程中臨時申請快速活檢。以便病理醫(yī)生在做冰凍診斷之前對患者的一般情況及初步臨床診斷做到心中有數(shù),縮短術(shù)中冰凍的時間。秉著為了患者健康的共同目標(biāo),臨床醫(yī)生和病理醫(yī)生要抱著互相支持互相關(guān)懷的友善心情對待每一個病理結(jié)果,一旦臨床醫(yī)生對病理報告存有異議時,應(yīng)馬上與病理醫(yī)生聯(lián)系。



冰凍包埋儀

-廣州秀威-

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型號:XW-BDY-01

產(chǎn)品優(yōu)勢:

  • 快速制冷  無需冷凍劑、干冰、液氮,斯特靈快速制冷
  • 操作簡單  彩色觸摸顯示屏
  • 獨立設(shè)定  6個冷凍槽獨立時間設(shè)定,不同組織不同時間設(shè)定
  • 適用范圍  適用于徠卡、Thermo、櫻花等冷凍頭使用
  • 最低-80℃  標(biāo)本快速冷凍,減少冰晶產(chǎn)生
  • 高效快速  一次冷凍包埋6個樣本

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