點擊下方空白區(qū)域查看答案 ▼ 1.侵襲性真菌病又稱侵襲性真菌感染(invasivefungalinfections,IFIs),是指真菌入侵人體組織、血液,經(jīng)生長繁殖對機體組織、器官功能造成損害,并引發(fā)炎性反應的一種感染性疾病。 2.侵襲性真菌病的流行病學 最常見的病原菌是以念珠菌為主的酵母樣真菌和以曲霉為主的絲狀真菌引起的感染最為常見。分別占到70%~90%和10%~20%。 近年來,隨著腫瘤患者手術和放化療等治療技術的廣泛開展,由惡性腫瘤、免疫缺陷、移植患者數(shù)目的增多以及長期應用廣譜抗生素、延長體內留置導管時間等,侵襲性真菌病發(fā)生率呈逐年上升趨勢。 例如,重癥監(jiān)護病房內患者的發(fā)病率約占8%~15%,器官移植受者的發(fā)病率為20%~40%,血液系統(tǒng)腫瘤患者的發(fā)病率達31%。 據(jù)不完全統(tǒng)計,全球150萬種真菌中有400多種可以導致嚴重的人類感染。相比于其他微生物感染,臨床對于真菌感染的認識不深、診斷方法有限、很多病人未能得到及時的診治。侵襲性真菌感染每年奪走160萬人的生命,死亡人數(shù)等同于瘧疾和結核(Bongominetal.2017)。 侵襲性真菌病常見于免疫功能低下人群,近年來,,患者受到真菌感染的發(fā)生率呈明顯上升趨勢,如何及時診斷并有效地治療侵襲性真菌病受到越來越多的關注。 1.目前,真菌檢驗技術主要包括 ①真菌培養(yǎng) ②組織病理學檢查 ③真菌涂片鏡檢 ④血清學檢測 ⑤分子生物學技術。 2.真菌檢驗技術的優(yōu)勢與劣勢比較 真菌培養(yǎng)和組織病理學檢查是真菌病最傳統(tǒng)的診斷方法。但是這兩種檢驗方法具有如下缺點: ①真菌培養(yǎng)的缺點: ◆如果取材自非無菌部位,則無法確定是否為感染。 ◆如以侵入性檢查從無菌部位獲取待測樣本,一般患者難以依從,重癥患者一般難以實施。 ◆培養(yǎng)需要較長時間。雖然新型培養(yǎng)基、自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)的出現(xiàn)顯著降低了微生物培養(yǎng)時間,然而未有明確證據(jù)表明這類進展可以提升診斷的敏感性。 ◆后續(xù)的鏡檢應當由經(jīng)驗豐富的檢驗人員操作。 ②組織病理學檢查的缺點: ◆雖然其作為常用的確診方法,但缺乏靈敏性和精確性。比如同一菌種的菌絲,在鏡下會表現(xiàn)出不同的形態(tài)。當需要將曲霉同其他絲狀菌區(qū)分以指導選擇抗真菌藥時,組織病理學檢查結果常會出現(xiàn)問題。 ③真菌涂片鏡檢的優(yōu)點與缺點: ◆比上述兩種方法更快速、簡單,成本也更低。 ◆直接鏡檢受主觀因素影響較大,對檢驗技術要求高,由于實驗室人員識別能力參差不齊,其陰性并不能明確排除真菌感染。 ④血清學檢測技術可大致分為抗原檢測和抗體檢測兩類。 抗原檢測包括:G試驗、GM試驗、GXM試驗(隱球菌莢膜多糖)、Mn試驗(念珠菌甘露聚糖)等。 抗體檢測包括:各個屬特異性IgM、IgG抗體檢測。 G試驗檢測靶標為真菌細胞壁非特異性成分(1-3)-β-D葡聚糖,主要用于全真菌非特異性快速篩查(除隱球菌和接合菌外),為國內外指南推薦的真菌篩查技術。G試驗可大致區(qū)分定殖或者侵襲性感染。G試驗根據(jù)其發(fā)展,可分為三代。前兩代樣本處理使用“加熱稀釋法”,第三代樣本處理法為堿處理法,從而大大減少了交叉反應。第三代G試驗結果讀取基于動態(tài)顯色法,檢驗時間大致為1h。 ◆第三代準確性高、穩(wěn)定性強、抗干擾強。同時G試驗對于侵襲性感染早期診斷意義很大。 1.歐洲癌癥研究和治療組織/侵襲性真菌感染協(xié)作組(EORTC/IFICG)標準、美國真菌病研究組(MSG)標準、美國抗感染學會(IDSA)指南、我國《血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標準與治療原則(第四次修訂版)》中都提到(1,3)-β-D-葡聚糖檢測(G試驗)是臨床診斷侵襲性真菌病的診斷標準之一。 經(jīng)臨床研究比較這3種檢驗方法發(fā)現(xiàn): ◆ (1,3)-β-D-葡聚糖可用于輔助侵襲性真菌病的早期診斷。但隱球菌、結核分枝桿菌引起的感染G試驗為陰性或輕度升高。 ◆ 實時熒光定量PCR檢測的陽性率>G試驗>PCT檢測,實時熒光定量PCR檢測和G試驗對侵襲性真菌病早期診斷中具有重要參考價值。 1.腫瘤患者在接受化療后,由于自身免疫力低下容易引起侵襲性真菌病??焖?、準確確定侵襲性真菌病的致病菌,選擇合適的檢測方法和指標對于早期診斷和治療侵襲性真菌病有重要價值,可有效降低因炎癥反應而導致的病理改變,以及死亡。 2.PCR技術具有耗時短,污染少,靈敏度、特異度高,以及重復性好的特點,陽性率高于血清PCT和(1,3)-β-D葡聚糖檢測,是早期診斷侵襲性真菌病的最佳檢驗方法。 近年來材料學以及生物傳感器領域不斷突破,病原體診斷、鑒定和定量分析的新方法和儀器方面得到了突飛猛進的發(fā)展。如微流控芯片實驗室技術平臺以及納米技術增強了檢測的敏感性、特異性和速度,因此各種基于恒溫擴增的lab-on-chip 裝置被廣泛開發(fā)并擬用于臨床病原體的檢測。相信隨著以上早期診斷技術的不斷應用、改進和創(chuàng)新,將使未來真菌病早期診斷技術將更加快速、準確,同時對臨床治療和流行病學的研究產(chǎn)生重要的影響。 本文為原創(chuàng)文章,屬醫(yī)家小二首發(fā),作者:簡川,感謝作者來稿!為尊重作者版權,未經(jīng)授權請勿轉發(fā)。 |
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