近年來,免疫缺陷病、惡性腫瘤、器官移植等患者,以及各類導(dǎo)管留置時間得延長、廣譜抗菌的暴露等患者越來越多,侵襲性真菌感染發(fā)生率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。 目前大多數(shù)醫(yī)院都在開展非侵襲性實驗室技術(shù)如 G 試驗(1,3-β-D 葡聚糖)和 GM 試驗(glactomannan,GM)對侵襲性真菌感染的高?;颊哌M行篩查檢測,以提高真菌感染的陽性率。 G 試驗: G 試驗是檢測真菌的細胞壁中 1,3-β-D 葡聚糖的試驗。1,3-β-D 葡聚糖幾乎存在于所有真菌細胞壁(除了結(jié)合菌和隱球菌)中,當(dāng)吞噬細胞吞噬真菌后,1,3-β-D 葡聚糖從細胞壁中釋放出來,從而導(dǎo)致血液及其他體液(如尿、腦脊液,腹水,胸水等)中 1,3-β-D 葡聚糖含量增高。 因 1,3-β-D 葡聚糖可特異性激活 1,3-β-D 葡聚糖檢測試劑中 G 因子,引起裂解物凝固,故稱 G 試驗,其檢測方法為比色法或比濁法。 GM 試驗:
看到這里,你也許會產(chǎn)生疑問,既然 1,3-β-D 葡聚糖幾乎存在于所有真菌細胞壁中,那豈不是只要做 G 試驗就完全足夠?qū)φ婢M行檢測了。 事實并非如此: 首先 G 試驗只能提示有無真菌侵襲性感染,并不能確定為何種真菌感染; 其次 G 試驗在以下幾種情況都會出現(xiàn)假陽性(鏈球菌血癥;使用纖維素膜進行血透,標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料;靜脈輸注白蛋白、免疫球蛋白或凝血因子等血液制品;檢測操作者處理標(biāo)本時存在污染,標(biāo)本暴露在其他含有葡聚糖的材料中;還有腫瘤患者使用多糖類抗癌藥物或放化療造成食物中的葡聚糖或胃腸道定植的真菌進入血液)。 GM 試驗又有哪些優(yōu)劣勢呢? GM 試驗主要應(yīng)用于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷,但對其他真菌來說檢測陽性率較低。 GM 試驗存在假陽性,可見于自身免疫性疾?。ㄈ缱陨砻庖咝愿窝祝?、飲用含半乳甘聚糖的牛奶等食物、血液透析或者使用了哌拉西林 / 他唑巴坦等半合成青霉素等情況。同時 GM 試驗也存在假陰性,可見于下面幾種情況:真菌感染入血的數(shù)量較少、之前使用了抗真菌活性的唑類藥物;非粒細胞缺乏患者等。 ? G 試驗 G 試驗可以作為早期鑒別侵襲性真菌?。↖FD)的檢測方法,在《血液病 / 惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則》(2020 年,第六次修訂版)中 G 試驗被推薦用于 IFD 早期診斷的重要篩選指標(biāo)。 同時《中國成人念珠菌病診斷與治療專家共識》中也指出 G 試驗的動態(tài)檢測十分必要,建議對高?;颊呙恐?2 次動態(tài)監(jiān)測以提高其特異性,并結(jié)合臨床表現(xiàn)及其他微生物學(xué)檢查結(jié)果綜合判斷。 ? GM 試驗 GM 試驗是診斷侵襲性曲霉菌感染的證據(jù)之一,在《血液病 / 惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則》(2020 年,第六次修訂版)中,血漿、血清、支氣管肺泡灌洗液或腦脊液的 GM 試驗陽性可作為曲霉菌感染的微生物標(biāo)準(zhǔn)。 曲霉菌感染部位主要集中在肺部,從而引起肺曲霉病,診斷曲霉菌在肺部是定植還是侵襲性生長,關(guān)鍵在于其是否合成 GM。GM 試驗陽性常早于患者出現(xiàn)臨床癥狀 5~8 天,比胸部 CT 影像學(xué)表現(xiàn)平均早 7 天,可作為早期診斷的重要手段。 有文獻報道肺泡灌液的 GM 試驗對臨床診斷肺曲霉病的敏感性高于血液,因此建議臨床懷疑肺曲霉病時送檢血液標(biāo)本時同時送檢肺泡灌洗液。由于 GM 釋放量與菌量成正比,因此 GM 值也可以反映感染程度,作為治療效果的參考指標(biāo)之一。 1. G 試驗和 GM 試驗各有優(yōu)劣,不能互相取代。有研究報道 G 試驗的陰性預(yù)測值為 96%~99%,可將 G 試驗作為 IFD 的有效篩查手段;GM 試驗可進一步明確真菌種屬。 2. 建議 G 試驗和 GM 試驗連續(xù)檢測,2 次陽性具有臨床診斷意義。但是 G 試驗和 GM 試驗存在假陽性和假陰性的可能,因此除了進行動態(tài)檢測以外,仍需結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判斷是否存在真菌感染。 3. G 試驗和 GM 試驗二者聯(lián)合應(yīng)用以提高對侵襲性真菌病的診斷效率,有研究報道 G 試驗和 GM 試驗聯(lián)合檢測對 IFD 陰性預(yù)測值接近 100%。 Q:如何解釋 G 試驗結(jié)果陰性而 GM 試驗結(jié)果陽性的情況? A:這是由于 G 試驗和 GM 試驗檢測的物質(zhì)不同,代謝規(guī)律存在差異導(dǎo)致的。 因為真菌只有被吞噬細胞吞噬后才能將 (1-3)-β-D 葡聚糖釋放出來,而半乳甘露聚糖表達在細胞壁,在曲霉繁殖生長的時候由菌絲釋放出來。若在感染早期進行 G 試驗和 GM 試驗,曲霉的生長分泌強于曲霉的死亡消化裂解,就會出現(xiàn) G 試驗結(jié)果陰性而 GM 試驗結(jié)果陽性的結(jié)果。 同時在粒細胞缺乏患者中,由于粒細胞吞噬真菌釋放的 (1-3)-β-D 葡聚糖較少,也會出現(xiàn) G 試驗結(jié)果陰性而 GM 試驗結(jié)果陽性的結(jié)果。 |
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