最近比較多的病人在問:我的G試驗(yàn)報(bào)告是陽性,GM試驗(yàn)報(bào)告是陰性,檢驗(yàn)科的結(jié)果是否不準(zhǔn)確,包括很多檢驗(yàn)科的人員都不明白這兩個(gè)試驗(yàn)到底是什么回事。要回到這個(gè)問題,首先得跟大家普及一下真菌的知識。 真菌,是一種真核生物。最常見的真菌是各類蕈(音xùn)類,另外真菌也包括霉菌和酵母。現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了七萬多種真菌,估計(jì)只是所有存在的一小半。大多真菌原先被分入動(dòng)物或植物,現(xiàn)在成為自己的界,分為四門。真菌自成一門,和植物、動(dòng)物和細(xì)菌相區(qū)別。真菌和其他三種生物最大的不同之處在于,真菌的細(xì)胞有含甲殼素(又叫幾丁質(zhì)、甲殼素、殼多糖)為主要成分的細(xì)胞壁,和植物的細(xì)胞壁主要是由纖維素組成的不同。細(xì)菌細(xì)胞壁主要成分則是肽聚糖,真菌細(xì)胞壁中主要成分為幾丁質(zhì)、纖維素、葡聚糖、甘露聚糖等,這些多糖都是單糖的聚合物。 G試驗(yàn)的代表廠家是美國查爾斯河實(shí)驗(yàn)室公司G試驗(yàn)檢測系統(tǒng),該系統(tǒng)主要檢測真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖。而其他微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液都不含這種成分。鱟([hòu]一種節(jié)肢動(dòng)物,甲殼類,生活在海中,尾堅(jiān)硬,形狀像寶劍,居住于沙質(zhì)淺水海域,常爬行或全身潛行于泥沙中)凝血系統(tǒng)中的凝血酶原G因子能識別這種葡聚糖,是G的天然檢測者。G因子的α亞基特異性識別G后,可激活血清凝固酶原上的β亞基,形成凝固酶,凝固酶可以參與凝血酶原級聯(lián)反應(yīng),使凝固蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀的凝固蛋白。因此在機(jī)體的體液中檢測到(1-3)-β-D葡聚糖是診斷深部真菌感染的有效依據(jù)。即使不能確定菌種,但能肯定是否有真菌感染。指導(dǎo)臨床科學(xué)合理的使用抗真菌藥物,因此可以作為侵襲性真菌感染的早期診斷指標(biāo)。當(dāng)檢測到標(biāo)本中葡聚糖含量較高時(shí),即可予以系統(tǒng)治療,不必等待真菌培養(yǎng)的結(jié)果,對臨床醫(yī)生采取積極的治療提供依據(jù)。且動(dòng)態(tài)快速檢測,不受血中抗生素和酶等的影響。另外,該公司還在此檢測系統(tǒng)上開發(fā)出革蘭氏陰性菌脂多糖檢測試劑,稱為鱟試驗(yàn)。其原理是革蘭氏陰性菌脂多糖(內(nèi)毒素)激活了鱟的凝血酶原C因子,形成凝固酶,凝固酶可以參與凝血酶原級聯(lián)反應(yīng),使凝固蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀的凝固蛋白。通過內(nèi)毒素水平的定量快速檢測評價(jià)由革蘭氏陰性細(xì)菌引起疾病的臨床診斷如腹膜炎、膿毒癥、SIRS、和MODS。 GM試驗(yàn)的代表廠家是美國BIO-RAD公司開發(fā)的曲霉菌抗原檢測試劑盒,檢測方法為ELISA法,檢測的物質(zhì)是半乳甘露聚糖抗原,主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷。曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β(1-5)呋喃半乳糖殘基,菌絲生長時(shí),半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放,是最早釋放的抗原。GM釋放量與菌量成正比,可以反映感染程度,連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測,在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。 G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)鑒定范圍對比
從上表也能看出:G試驗(yàn)陽性,GM試驗(yàn)可能為陰性,如念珠菌屬、鐮刀菌屬感染;G試驗(yàn)陰性性,GM試驗(yàn)可能為陽性,如隱球菌屬感染。 G試驗(yàn)的臨床應(yīng)用 1、早期診斷:侵襲性真菌感染增多且復(fù)雜,早期癥狀無特異性,往往被原發(fā)病掩蓋,病程長,發(fā)現(xiàn)較晚,死亡率高。因此對深部真菌感染治療成敗的關(guān)鍵在于早期診斷。 2、快速診斷:真菌感染就醫(yī)的患者,往往病情嚴(yán)重,傳統(tǒng)的微生物分離、培養(yǎng)與鑒定需要時(shí)間較長,患者在等待期間有可能病情加重,甚至死亡。 3、指導(dǎo)用藥:快速確定真菌感染后,選擇好治療方案,有針對性使用抗真菌類藥物。為臨床選用副作用小,療效高,價(jià)格適宜的藥物提供準(zhǔn)確的依據(jù)。 4、動(dòng)態(tài)觀察:可用于動(dòng)態(tài)隨訪疾病的變化,(1-3)-β-D葡聚糖水平高低能夠提示疾病的發(fā)展和預(yù)后。(1-3)-β-D葡聚糖水平在確診IFI 患者的血清中出現(xiàn)持續(xù)升高,而隨著藥物的使用,對藥物敏感者可很快出現(xiàn)(1-3)-β-D葡聚糖水平下降及轉(zhuǎn)陰,而藥物治療無效人群(1-3)-β-D葡聚糖值無明顯改變。 5、鑒別真菌種類:不同的(1-3)-β-D葡聚糖值可反映不同真菌菌種感染,如念珠菌感染者血清平均(1-3)-β-D葡聚糖值為755 pg/mL;曲霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值為110 3pg/mL;鐮刀霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值為1652 pg/mL;隱球菌和接合菌(毛霉、根霉)細(xì)胞壁不產(chǎn)(1-3)-β-D葡聚糖,感染接合菌的患者血清(1-3)-β-D葡聚糖值為0。而對于口腔和其他器官的真菌定植患者,(1-3)-β-D葡聚糖值也較低,一般不超過20 pg/mL。 6、監(jiān)護(hù)病程:監(jiān)護(hù)深部真菌感染易感人群的病發(fā)狀態(tài)。
GM試驗(yàn)的臨床應(yīng)用 近10年來,臨床侵襲性真菌感染的患者數(shù)量呈明顯增長趨勢,構(gòu)成住院病人死亡的主要原因之一。其中侵襲性曲霉菌感染是構(gòu)成真菌感染的最嚴(yán)重形式,曲霉菌感染主要發(fā)生在中性粒細(xì)胞減少癥病人(抗癌治療引起)和免疫抑制劑治療的病人(器官移植,特別是骨髓移植)以及使用皮質(zhì)激素治療的病人中。通常開始于吸入環(huán)境中的曲霉菌孢子之后。由于曲霉菌幾乎不能從血培養(yǎng)基中分離出來,其診斷通常建立在非特異性診斷或放射影像學(xué)檢查結(jié)果上(臨床癥狀,CT掃描,胸部X-光檢查等),很難實(shí)現(xiàn)早期診斷。血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原檢測的出現(xiàn),為實(shí)現(xiàn)曲霉菌感染的早期診斷帶來了巨大的臨床價(jià)值,獲得國內(nèi)外醫(yī)生的廣泛認(rèn)可,已成為侵襲性曲霉菌感染診斷的重要檢測方法。目前,該檢測已被全球權(quán)威組織EORTC/MSG推薦使用并定義為侵襲性曲霉菌感染早期診斷金標(biāo)準(zhǔn);國內(nèi)的《中國侵襲性真菌感染工作組》《中華醫(yī)學(xué)會(huì)重癥醫(yī)學(xué)分會(huì)》也對該檢測為臨床帶來的價(jià)值做了透徹的解讀。 來源:梨醫(yī)檢驗(yàn) |
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