前面我們一塊學(xué)習(xí)了蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫及蛋白的提取過程,那么研究基因的表達(dá)和調(diào)控時常常要從組織和細(xì)胞中分離和純化RNA。目前常用Trizol法進行提取組織或細(xì)胞中的RNA。 Trizol法是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。 雖然Trizol里面含有RNA酶抑制劑的,1ml的Trizol一般最多只能裂解100mg的組織。但是如果組織過量,Trizol無法完全浸潤組織無法完全裂解組織,多余組織內(nèi)的RNA酶等物質(zhì)會導(dǎo)致RNA的降解。這是RNA降解的很重要的原因。 同時,由于RNA容易降解,在實驗過程中一般都要求口罩的,避免組織的污染。同時選用的無RNA酶的進口槍頭、EP管以及DEPC水,在提取過程中,一定要時刻提醒自已RNase Free-RNase Free-RNase Free,實驗就成功一半啦~ 醫(yī)學(xué)方已推出“實驗室那些事兒”“SCI寫作技巧”“文獻精讀與解析”“醫(yī)學(xué)英語輕松學(xué)”“國自然基金申請”“臨床數(shù)據(jù)挖掘”、“基因數(shù)據(jù)挖掘”、“R語言教程”、“醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)”、“微創(chuàng)動物實驗培訓(xùn)”等多個專題課程,如需了解課程詳細(xì)推文,可關(guān)注“醫(yī)學(xué)方”公眾號,點擊“精品專題”進入 |
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