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Polysome profiling技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法

 生物學(xué)渣 2024-11-27 發(fā)布于廣東

  前言

  新使生物推出多聚核糖體分析(Polysome profiling)服務(wù),我們引進(jìn)Biocomp全自動(dòng)密度梯度制備與核糖體分選一體機(jī),制備蔗糖密度梯度分離多聚核糖體,繪制多聚核糖體圖譜,適用于哺乳動(dòng)物、植物及真菌等多物種樣品類型的分析。

  技術(shù)原理

  一般來(lái)說(shuō),翻譯越旺盛,結(jié)合在一條mRNA上的核糖體數(shù)量就越多,蔗糖梯度離心時(shí)的沉降速率越快,因此可以通過(guò)沉降系數(shù)的差異將結(jié)合不同數(shù)量核糖體的mRNA通過(guò)離心進(jìn)行分離,比較不同組分中蛋白和轉(zhuǎn)錄本的差異。

  實(shí)驗(yàn)流程方法

  Polysome profiling是一種翻譯組學(xué)的研究方法,其操作流程為先用放線菌酮或氯霉素處理樣本,然后裂解細(xì)胞,離心并取上清液,之后將上清液轉(zhuǎn)移至蔗糖梯度上進(jìn)行超離。最后,進(jìn)行核糖體檢測(cè)及分離。研究人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,繼續(xù)做PCR定量分析、蛋白質(zhì)提取等實(shí)驗(yàn)。

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