大家都說(shuō)或者經(jīng)常聽(tīng)說(shuō)不同方法分離出來(lái)的外泌體具有不同的作用，或者A方法得到的有X作用，但B方法得到的沒(méi)有這種作用。但一直沒(méi)有文獻(xiàn)對(duì)此做過(guò)專(zhuān)門(mén)報(bào)道，下面我們來(lái)看看最新一篇Sci Rep比較了幾種常見(jiàn)分離方法后得出了什么樣的結(jié)論吧。

外泌體具有獨(dú)特的生物學(xué)作用，且在疾病治療上具有很好的應(yīng)用前景，因此日益受到研究者們重視。然而，從體液中分離外泌體的方法仍有待改善，其詳細(xì)的理化性質(zhì)仍未得到徹底明確。來(lái)自意大利布雷西亞大學(xué)的研究者們利用最常用的四種分離方法從多發(fā)性骨髓瘤患者血清分離到外泌體，并利用Western blot，膠體納米表面等離子體光子學(xué)，原子力顯微鏡（AFM）和掃描氦離子顯微鏡（HIM）等評(píng)估生物化學(xué)和生物物理技術(shù)制劑殘留污染物的存在。用碘克沙醇和蔗糖梯度離心獲得的外泌體是最純的。相反，那些通過(guò)常規(guī)差速超速離心或一步法沉淀試劑盒獲得的外泌體被殘余基質(zhì)污染嚴(yán)重。與純凈的外泌體相比，被污染的外泌體顯示出較低的誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的NF-κB入核能力，可能是因?yàn)檫@些雜質(zhì)阻止了外泌體與細(xì)胞膜的相互作用和融合能力。這些結(jié)果表明，外泌體制備的純度必須仔細(xì)評(píng)估，因?yàn)檫@會(huì)影響外泌體的生物活性。

碘克沙醇和蔗糖梯度離心獲得的外泌體具有明顯的促NF-κB入核作用

后記：看看，甭說(shuō)一步試劑沉淀法了，就連我們常說(shuō)的金方法差速超速離心法，與碘克沙醇和蔗糖密度梯度離心相比，就該paper探究的促進(jìn)NF-κB入核的功能來(lái)說(shuō)簡(jiǎn)直就是沒(méi)有啊。所以，各位外泌體研究的同行們，當(dāng)你沒(méi)有找到你想要的表型時(shí)，想一想利用最好最純的方法——碘克沙醇和蔗糖梯度離心是不是就可能發(fā)現(xiàn)你要的表型呢？

參考文獻(xiàn)：Paolini, L., et al. (2016). "Residual matrix from different separation techniques impacts exosome biological activity." Sci Rep 6: 23550. IF=5.578