快意談“編輯”,煮酒論“剪刀” 眾所周知,基因編輯的世界,曾是TALEN、ZFN和CRISPR/Cas三足鼎立,可如今CRISPR越來越紅火,竟隱約有幾分獨占鰲頭的感覺。 可同樣是基因編輯技術(shù),TALENs和ZFN這兩個江湖前輩,怎么就比不過CRISPR這個后起之秀呢?究竟三者之間誰才真正更勝一籌呢? 在本期《文獻精讀》課程中,解螺旋翡翠老師F&G分享了關于基因編輯的系列文章,聚焦于該領域里主流的編輯技術(shù),詳細講解各種技術(shù)的原理、操作方法、實例應用分析以及優(yōu)缺點,可讓該領域的逐浪者按需選擇相應技術(shù)。 1 作為研究基因體內(nèi)實驗的利器,基因敲除小鼠對于科研人員來說自然不是一個陌生的領域,這其中就涉及到了基因編輯技術(shù)領域中最為經(jīng)典的技術(shù)Cre-loxP系統(tǒng)。 因而,課程中則先是詳細介紹了Cre-loxP系統(tǒng)的原理,如Cre重組酶和loxp序列的概念與特點、以及Cre重組酶介導loxp序列重組的三種情況。 隨后,課程也逐步拆解該技術(shù)的具體操作方法,從而實現(xiàn)全身編輯小鼠和條件編輯小鼠的獲取。 2 其實,在CRISPR成為基因編輯領域的王者之前,是鋅指核酸酶(ZFN)和轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應子(TALEN)這兩類新型的編輯技術(shù),掀起一浪又一浪的基因編輯高潮,是科研界里當之無愧的“香餑餑”。 因而,課程中則詳細介紹了ZFN和TALEN技術(shù)的實驗原理,隨后以TALEN技術(shù)為例,細述了該技術(shù)實行的操作方法。 3 CRISPR之所以能風靡全球,是因為它來源于細菌抵御病毒侵染的天然免疫系統(tǒng),是來自生物學的真正禮物。與其它基因組編輯工具相比,它更易于操作,具有更強的可擴展性。 4 課程中對以上4種基因編輯技術(shù)的優(yōu)缺點進行了全面的比較,為基因功能研究提供了一份實用指南,可以讓該領域的科研者,依據(jù)各自研究目的和需要,簡單直觀的找到最適合自己的技術(shù)。 5 科研領域中,新興技術(shù)在不斷的涌現(xiàn),尤其是基于CRISPR系統(tǒng)(CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas13系統(tǒng))衍生的RNA編輯技術(shù),也在日新月異的發(fā)展著,這也為日后的生物學研究提供了越來越大的助力。 |
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