G試驗與GM試驗,一字之差,很多人不明白這兩個試驗到底是什么回事。 G試驗主要檢測的是真菌的細(xì)胞壁成分(1,3)-β-D-葡聚糖, 這是真菌特有的生物學(xué)屬性, 只要標(biāo)本中檢測到(1-3)-β-D葡聚糖, 就是診斷侵襲性真菌感染的依據(jù), 再進一步進行菌種鑒定,就能指導(dǎo)臨床科學(xué)合理的使用抗真菌藥物。 GM試驗檢測的物質(zhì)是半乳甘露聚糖抗原,常見于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷。GM釋放量與菌量成正比,可以反映感染程度,連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測,在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。 從上表也能看出:G試驗陽性,GM試驗可能為陰性,如念珠菌屬、鐮刀菌屬感染;G試驗陰性性,GM試驗可能為陽性,如隱球菌屬感染。 G試驗的臨床應(yīng)用 1、早期快速診斷:G試驗可早于臨床癥狀及影像學(xué)證據(jù)5-14天提示陽性。侵襲性真菌感染增多且復(fù)雜,早期癥狀無特異性,往往被原發(fā)病掩蓋,病程長,發(fā)現(xiàn)較晚,死亡率高。真菌感染就醫(yī)的患者,往往病情嚴(yán)重,傳統(tǒng)的微生物分離、培養(yǎng)與鑒定需要時間較長,患者在等待期間有可能病情加重,甚至死亡。早期快速診斷真菌感染具有重要意義。 2、指導(dǎo)用藥:快速確定真菌感染后,選擇好治療方案,有針對性使用抗真菌類藥物。為臨床選用副作用小,療效高,價格適宜的藥物提供準(zhǔn)確的依據(jù)。 3、動態(tài)觀察:可用于動態(tài)隨訪疾病的變化,(1-3)-β-D葡聚糖水平高低能夠提示疾病的發(fā)展和預(yù)后。(1-3)-β-D葡聚糖水平在確診IFI 患者的血清中出現(xiàn)持續(xù)升高,而隨著藥物的使用,對藥物敏感者可很快出現(xiàn)(1-3)-β-D葡聚糖水平下降及轉(zhuǎn)陰,而藥物治療無效人群(1-3)-β-D葡聚糖值無明顯改變。 4、鑒別真菌種類:不同的(1-3)-β-D葡聚糖值可反映不同真菌菌種感染,如念珠菌感染者血清平均(1-3)-β-D葡聚糖值為755 pg/mL;曲霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值為110 3pg/mL;鐮刀霉感染者平均(1-3)-β-D葡聚糖值為1652 pg/mL;隱球菌和接合菌(毛霉、根霉)細(xì)胞壁不產(chǎn)(1-3)-β-D葡聚糖,感染接合菌的患者血清(1-3)-β-D葡聚糖值為0。而對于口腔和其他器官的真菌定植患者,(1-3)-β-D葡聚糖值也較低,一般不超過20 pg/mL。 6、定植菌:多項研究表明,定植菌幾乎不引起(1-3)-β-D葡聚糖升高,即使是嚴(yán)重定植。因此G試驗陰性抗原區(qū)分定植菌和侵襲性感染。 G試驗的臨床問題解答 1.G試驗與血培養(yǎng)結(jié)果不符 兩種檢測方法可聯(lián)合作為判斷檢測結(jié)果的依據(jù),血培養(yǎng)可以檢測G試驗不能檢測的接合菌和隱球菌,G實驗可以實現(xiàn)血培養(yǎng)不能達到的早期、快速、定量檢測。 2.G試驗為什么要強調(diào)連續(xù)檢測 (1-3)-β-D葡聚糖水平是隨著疾病過程而變化的。 我國許多侵襲性細(xì)菌感染診斷標(biāo)準(zhǔn)中均要求2次檢測結(jié)果均大于診斷值才有診斷意義。在疾病早期重視連續(xù)檢測,可避免出現(xiàn)漏診或誤診。 3.哪些抗菌藥物對G試驗有干擾現(xiàn)象 文獻報告磺胺類、阿莫西林/克拉維酸、頭孢類藥物可造成假陽性。 患者使用血液制品血液制品(白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等)血液制品中白蛋白和免疫球蛋白可激活G因子途徑,對G試驗影響很大。文獻報告,靜脈輸入IgG 10g可使血漿G濃度升高達300pg/ml以上,這足以誤診為IFI。也有文獻報告只有檢測G試驗前的兩天內(nèi)使用了大于30g的白蛋白,才會顯著性影響檢測結(jié)果。此外,靜脈高營養(yǎng)液也常導(dǎo)致G試驗出現(xiàn)假陽性(與含有葡萄糖酸鹽成分有關(guān))。 4.抗腫瘤藥物或透析治療及手術(shù)后多長時間檢查G試驗可避免假陽性 主要取決于相關(guān)藥物的半衰期。血漿白蛋白或免疫球蛋白的平均半衰期為20小時,一周后復(fù)查可作為IFI的鑒別。對于服用抗腫瘤藥患者,停藥后一般48小時后可檢測。 5.某些細(xì)菌敗血癥引起G試驗假陽性的誘因 文獻報道某些細(xì)菌敗血癥患者,機體內(nèi)易產(chǎn)生許多炎癥因子,該炎癥因子可參與試驗過程,引起假陽性結(jié)果。 6.假陰性的原因有 隱球菌和接合菌(犁頭霉、毛霉、根霉)感染,但是也有文獻認(rèn)為隱球菌感染者有25%G試驗可以陽性。 免疫復(fù)合物形成。 GM試驗的臨床應(yīng)用 近10年來,臨床侵襲性真菌感染的患者數(shù)量呈明顯增長趨勢,構(gòu)成住院病人死亡的主要原因之一。其中侵襲性曲霉菌感染是構(gòu)成真菌感染的最嚴(yán)重形式,曲霉菌感染主要發(fā)生在中性粒細(xì)胞減少癥病人(抗癌治療引起)和免疫抑制劑治療的病人(器官移植,特別是骨髓移植)以及使用皮質(zhì)激素治療的病人中。通常開始于吸入環(huán)境中的曲霉菌孢子之后。由于曲霉菌幾乎不能從血培養(yǎng)基中分離出來,其診斷通常建立在非特異性診斷或放射影像學(xué)檢查結(jié)果上(臨床癥狀,CT掃描,胸部X-光檢查等),很難實現(xiàn)早期診斷。血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原檢測的出現(xiàn),為實現(xiàn)曲霉菌感染的早期診斷帶來了巨大的臨床價值,獲得國內(nèi)外醫(yī)生的廣泛認(rèn)可,已成為侵襲性曲霉菌感染診斷的重要檢測方法。 GM試驗的臨床問題解答 造成GM實驗假陽性的因素主要有 1、使用了半合成青霉素,如哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸等。 2、與其他細(xì)菌或真菌成分有交叉反應(yīng),例如馬內(nèi)菲青霉(多種青霉、擬青霉)、深紅酵母、新生隱球菌 、頭地霉 、頂孢霉、鏈格孢 、郁金香葡萄孢 、枝狀枝孢霉 、多主枝孢霉 、尖鐮孢 、宛氏擬青霉、產(chǎn)黃青霉、指狀青霉、紅色發(fā)癬菌 等。 3、腸道中定植的曲霉釋放GM進入血液。 4、谷物食物中存在GM(如大豆),通過受損腸粘膜進入血液。 5、接受白蛋白、免疫球蛋白和其他營養(yǎng)液治療。 6、多發(fā)性骨髓瘤。 7、血液透析(與纖維素透析膜中含有半乳糖成分有關(guān))。 8、接受心肺旁路手術(shù)(與使用大劑量肝素有關(guān))。 9、自身免疫性肝炎等免疫性疾病。 10、新生兒和兒童(FP 83%,與雙歧桿菌交叉反應(yīng))。 造成GM實驗假陰性的因素主要有 1、抗體多,出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。 2、釋放入血的半乳甘露聚糖不持續(xù),而很快被清除。 3、局部感染,包括慢性肉芽腫。 4、菌絲少,侵血管性弱。 5、非粒細(xì)胞缺乏患者( 對此現(xiàn)象的解釋是由于中性粒細(xì)胞能吞噬并快速殺傷菌絲,使體內(nèi)真菌載量降低,從而使釋放入血液的GM 減少,此外,粒細(xì)胞表面存在甘露糖受體,可以結(jié)合GM,兩者均導(dǎo)致GM試驗出現(xiàn)假陰性結(jié)果)。 6. GM試驗假陽性的因素除了以上原因外,還有其他未知的因素,需要在臨床實踐中發(fā)現(xiàn)和總結(jié)。避免假陽性的辦法是多次重復(fù)檢測。 吳井檢驗科 |
|