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[摘要] 桑黃（phellinus）作為寄生在桑樹上的真菌，在2 000多年前就有用作珍貴中藥材的記載，在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、延緩衰老和抗腫瘤等方面具有良好的功效。該文綜合近幾年國內(nèi)外有關(guān)桑黃的分類學(xué)問題、活性成分、藥效及其作用機(jī)制、提取工藝等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行闡述，并對目前存在的問題及今后的研究方向進(jìn)行了探討。 [關(guān)鍵詞] 桑黃；分類學(xué)；活性成分；抗腫瘤；藥效機(jī)制；提取工藝 [收稿日期] 2014-03-20 [基金項目] 國家自然科學(xué)基金項目（81201551）；重慶市自然科學(xué)重點(diǎn)基金項目（cstc2013jcyjys0007）；中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項（XDJK2013B020，SWU111014，SWU112033） [通信作者] 崔紅娟，教授，博士生導(dǎo)師，Tel：（023）68251713，E-mail： hongjuan.cui@gmail.com 桑黃作為我國傳統(tǒng)的中藥材，最早記載于《神農(nóng)百草經(jīng)》和李時珍的《本草綱目》，主要用于止瀉、崩漏帶下、脾虛泄瀉，此外還能利五臟、排毒、活血。在20世紀(jì)70年代就已經(jīng)認(rèn)識到桑黃的抗腫瘤效果[1]，在過去的30年里，其20多種藥效逐漸為人們所探知，如增強(qiáng)機(jī)體免疫、保肝護(hù)肝、治療關(guān)節(jié)炎等[2]；其相關(guān)藥用成分也被逐漸提取出來，純化工藝也不斷得到改進(jìn)。本文綜合近幾年研究成果，現(xiàn)對桑黃有效成分的藥理學(xué)機(jī)制等幾個方面進(jìn)行闡述。 1 桑黃的分類學(xué)地位 “桑黃”是硬質(zhì)的多孔菌，根據(jù)2011年吳聲華、戴玉成的鑒定結(jié)果，桑黃屬于擔(dān)子菌門Basidiomycota刺革菌目Hymenochaetales刺革菌科Hymenochaetaceae[3]。作為珍貴的藥用菌種，傳統(tǒng)叫法中的“桑黃”是多個種的統(tǒng)稱，包括鮑氏針層孔菌Phellinus baumii， 火木針層孔菌P. igniarius和裂蹄針層孔菌P. linteus等， 屬于針層孔菌屬Phellinus Quel[4]。直到2012年，吳聲華[5]從各地取得相關(guān)標(biāo)本，分析其形態(tài)學(xué)及核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)核糖序列，發(fā)現(xiàn)真正的桑黃是一新種Inonotus sanghuang，分布于中、日、韓三國，野外僅生于桑屬M(fèi)orus的樹干，幾近絕跡，很難尋找。而被廣泛誤認(rèn)為桑黃學(xué)名的P. linteus并不生長在桑樹上，P. baumii則生長于丁香屬Syringa的枝干，而P. igniarius生長在多種闊葉樹上。人們對桑黃的應(yīng)用和研究往往也以贗品或少數(shù)真品的混雜種類為據(jù)。綜合多篇文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)其中研究較多，藥效認(rèn)可度較高的有針層孔菌屬的P. baumii，P. linteus和P. igniarius 3個種[6-7]，并將其中有共識的研究成果整理，本文沿用過去的叫法統(tǒng)稱這些種為“桑黃”。 2 桑黃的活性成分及其分子結(jié)構(gòu) 桑黃主要寄生于桑、楊、暴馬丁香、松、白樺等樹干上[8]。桑黃的化學(xué)成分有多糖、黃酮、香豆素、麥角甾醇、落葉松覃酸、脂肪酸、三菇類、芳香酸和多種氨基酸，以及木糖氧化酶、脲酶、醋酶、過氧化氫酶、蔗糖酶、乳糖酶、纖維素酶等多種酶類[8-9]。有研究統(tǒng)計，桑黃的藥理學(xué)功能有20多種，包括抑菌、消炎、抗氧化、抗腫瘤、加強(qiáng)機(jī)體免疫、保肝護(hù)肝、降血糖、降血脂、抗肺炎等[2]，其有效成分主要是多糖、黃酮、三萜和酚類物質(zhì)[10-11]（表1）。 齊欣等[8]對6種不同樹種的桑黃藥效成分進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，桑樹桑黃子實(shí)體中多糖、黃酮和三萜的含量均高于其他樹種；因生長的樹種不同，在藥效成分含量上也有所差異。王欽博[12]認(rèn)為一年生桑黃子實(shí)體多糖、黃酮類和三萜的含量要略高于二年生，抗氧化活性也優(yōu)于二年生桑黃；此外，菌絲體和子實(shí)體中多糖含量也有所差異，回晶等[9]對P. igniarius進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其菌絲體中多糖含量是子實(shí)體的1.55倍。 2.1 桑黃多糖 桑黃子實(shí)體多糖以雜多糖為主，主要的單糖有甘露糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖[13]。小分子多糖的單糖組成為β-D-半乳吡喃糖，大分子多糖的單糖組成為β-D-葡萄吡喃糖，β-D-葡萄糖單元通過（1→3）鍵連接形成直鏈多糖[13-15]。近年來，桑黃多糖的提取鑒定有了新的進(jìn)展，如Baker等[16]從P. baumii中分離到的水溶性多糖主要由葡萄糖和甘露糖單體構(gòu)成，其結(jié)構(gòu)主鏈為β-（1→3）葡聚糖，支鏈為β-（1→3）甘露糖并通過β-（1→6）糖苷鍵連接于主鏈；葛青[13]從桑黃子實(shí)體提取到活性葡聚糖PBF6，其葡萄糖單體以1，6和1，3連接2種形式存在，其摩爾比為1∶2，主鏈結(jié)構(gòu)為→3）-β-D-Glcp-（1→3）-β-D-Glcp-（1→6）-β-D-Glcp-（1→。Yang等[17-18]在2007年從P. igniarius的子實(shí)體中分離到一種大小為1.71×104 Da的雜多糖PIP60-1，由5種單糖包括L-巖藻糖、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和3-O-Me-半乳糖按1∶1∶1∶2∶1組成（圖1）；并于2009年分離到1種大小為22 kDa的雜多糖PISP1，其包含4種單體巖藻糖、半乳糖、甘露糖和3-O-Me-半乳糖按1∶2∶1∶2組成（圖2）。 2.2 黃酮類化合物 黃酮類化合物具有很好的抗黃嘌呤氧化酶、抗氧化、抗突變活性[19]。莫順燕等[20-22]利用萃取、柱色譜、反向HPLC等技術(shù)從P. igniarius子實(shí)體成功分離到7種黃酮化合物：柚皮素（4′，5，7-三羥基二氫黃酮），櫻花亭（4′，5-二羥-7-甲氧基二氫黃酮），二氫莰非素（4′，5，7-三羥基二氫黃酮醇），7-甲氧基二氫莰非素（4′，5-二羥基-7-甲氧基二氫黃酮），北美圣草素（3′，4′，5，7-四羥基二氫黃酮），桑黃黃酮A（5，7，4′-三羥基-6-2″-羥基芐基二氫黃酮），桑黃黃酮B（5，7，4′-三羥基-8-2″-羥基芐基二氫黃酮）。其中，桑黃黃酮A和B為2個新發(fā)現(xiàn)的化合物。 2.3 三萜類化合物 桑黃中已知的三萜類化合物有軟木三烯酮，β-乳香酸，熊果酸，natalic， torulosic acid，albertic acid， pomacerone，javeroic acid，phellinic acid等[14， 23-26]。2009年，Liu等[27]從P. Gilvus中提取出4個新的羊毛甾三萜：gilvsins A，B，C，D。其中g(shù)ilvsins A是一種針狀晶體，結(jié)構(gòu)式為22-hydroxy-24-methylenelanost-8-en-3-one；gilvsins B作為白色非晶體粉末，其結(jié)構(gòu)式為3β-，22R-dihydroxy-24-methylenelanost-8-en-28-oic；gilvsins C結(jié)構(gòu)式為22R-hydroxy-24-methylene-29-norlanost-8-en-3-one；gilvsins D的結(jié)構(gòu)式為22R-hydroxy-24-methylene-3-norlanost-8-en-oic。隨后，Wang[28]從P. igniarius子實(shí)體中分離到4種新的羊毛甾類三萜igniarens A， B， C， D：22R-hydroxy-24-methylene-29-norlanost-7，9（11）-dien-3-one（A），3α，22R-dihydroxy-24-methylene-29-norlanost-7，9（11）-diene（B），3α，22R-dihydroxy-24-methylene- 29-norlanost-8-ene（C）和3α，22R -dihydroxy-24-methylenelanost -8-ene（D），4種化合物均為非晶體固體，其中化合物B和D可以顯著抑制由LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞一氧化氮（NO）合成。 2.4 吡喃酮類化合物 近幾年，國內(nèi)外關(guān)于吡喃酮藥效的研究較多[29-35]。吡喃酮是桑黃中的一類多酚類色素，有苯乙烯基吡喃酮（hispidin）骨架和苯并吡喃酮骨架。苯乙烯基吡喃酮骨架（styrylpyrones）一般由多個hispidin[6-（3，4-dihydroxystyrl）-4-hydroxy-2-pyrone]，或由hispidin與hispolon[6-（3，4-dihydroxyphenyl）-4-hydroxy-3，5-hexadien-2-one]縮合而成，具有很好的抗氧化、抗突變、抗腫瘤和降低血糖的功效[33， 36-37]。1996年，Ali等[38]從纖孔菌屬中分離到hispidin和hispolon，并對其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定，確定為酚類化合物；Mo等[39]從P. Igniarius中提取到3種吡喃酮類化合物，經(jīng)驗證具有護(hù)肝的功效；2010年，Lee等[37]從P. Baumii中提取到一種新的苯乙烯基吡喃酮baumin（圖3），分子式為C27H22O11，為黃色粉末，具有很好的自由基清除能力，能抑制由Fenton 反應(yīng)引起的DNA超螺旋斷裂。 2.5 其他活性物質(zhì) Wu等[40]從P. igniarius中分離到4種甾體，還有1種homopregnene、3種heptanorergosterane以及9種倍半萜。其中，3β-hydroxy-11，12-O-isopropyldrimene具有良好的血管舒張效果，能夠有效緩解苯腎上腺素誘發(fā)的血管收縮。吳秀麗等[41]從發(fā)酵液和菌絲體中提取到29個新的化合物，其中化合物豆甾-7，22-二烯-3β，5α，6α-三醇、環(huán)（L-亮氨酸-D-脯氨酸）有神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)活性，環(huán)（苯丙氨酸-絲氨酸）、環(huán)（6-羥基-脯氨酸-苯丙氨酸）有肝細(xì)胞損傷保護(hù)活性。 3 桑黃的主要功效及作用機(jī)制 3.1 免疫調(diào)節(jié) 研究表明，免疫調(diào)節(jié)是多糖類物質(zhì)最基本的藥理作用，桑黃多糖的許多活性作用如抗腫瘤、保護(hù)肝損傷、降血糖、抗氧化等都與其免疫調(diào)節(jié)功能有關(guān)[42-46]。桑黃蛋白多糖可以激活蛋白激酶C（PKC）和蛋白酪氨酸激酶（PTK）信號通路從而激活機(jī)體B淋巴細(xì)胞的增殖[47]，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能[48-50]，并提高對自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell， NK）和LAK（lymphokine activated killer）的活性[51-53]。傅海慶等[54]用桑黃口服液飼喂小鼠，發(fā)現(xiàn)高劑量組小鼠的脾臟和胸腺重量顯著增加，吞噬細(xì)胞的吞噬能力提高；桑黃多糖還能夠顯著提升Th1細(xì)胞的功能，Th1細(xì)胞屬于輔助性T淋巴細(xì)胞，在正向調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫中發(fā)揮重要作用[47]。 3.2 抗氧化、防衰老作用 人體內(nèi)的自由基是衰老和一些疾病發(fā)生的原因之一，當(dāng)體內(nèi)自由基產(chǎn)生過多或清除過慢時，各種細(xì)胞、組織和器官就會受到損傷，進(jìn)而加速機(jī)體的衰老并誘發(fā)各種疾病[55]。而桑黃的酚提取物hispidin對超氧陰離子、羥基自由基和 DPPH 都具有一定的清除作用[29]；桑黃多糖能保護(hù)線粒體DNA免受活性氧基團(tuán)造成的損傷，防止線粒體功能紊亂[56]；Yuan等[57]從P. ribiis中提取多糖，發(fā)現(xiàn)能降低血液中丙二醛（MDA）含量，同時加強(qiáng)血清中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性；祝子坪等[58]采用化學(xué)模擬體系測定桑黃胞內(nèi)多糖與胞外多糖體外抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)桑黃多糖抗氧化能力有明顯的量效關(guān)系，且胞外多糖與胞內(nèi)多糖在清除羥基自由基、超氧陰離子、DPPH等方面能力不同；Kozarski等[59]以桑黃多糖為材料，通過測定其還原能力來研究抗氧化能力。結(jié)果顯示，一定范圍內(nèi)，桑黃多糖提取物的還原能力隨著樣品濃度提高而明顯增加，隨后還原能力保持穩(wěn)定不變。Lee等[36]認(rèn)為桑黃的抗氧化能力與其含有大量的多酚類物質(zhì)有關(guān)；王欽博等[60-62]對桑黃的子實(shí)體中的抗氧化成分進(jìn)行了分離純化，將得到的化合物進(jìn)行清除超氧陰離子、羥基自由基、DPPH自由基、NO自由基等抗氧化實(shí)驗，發(fā)現(xiàn)分離到的一種吡喃酮類化合物（C15H18O9）在清除自由基及其它抗氧化方面均有顯著活性，對損傷的PC12神經(jīng)細(xì)胞也有很好的修復(fù)能力，并能延緩其衰老。 3.3 抗腫瘤作用 桑黃具有明顯優(yōu)越的抗癌能力，其提取物能夠有效抑制包括人類結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480等細(xì)胞的增殖[63]，可以顯著提高機(jī)體免疫能力，并能降低化療藥物造成的免疫系統(tǒng)損傷，對環(huán)磷酰胺起著增效減毒作用，延長小鼠存活時間[64-67]。溫克等[68]比較了桑黃，靈芝，阿加里斯茸，PL-2.PL-5 4種藥物對小鼠移植性胃癌和S180腫瘤的抑制作用，結(jié)果顯示桑黃在4類藥物中具有較好的腫瘤抑制效果。 桑黃的抗腫瘤能力主要與3個方面相關(guān)。 ①加強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答。王超?等[69]研究了火木層孔菌等6種桑黃的石油醚提取物對小鼠的抗腫瘤活性影響，發(fā)現(xiàn)6種提取物均能增加小鼠各免疫器官指數(shù)，從而提高荷瘤小鼠的機(jī)體免疫力；Kim G Y等[47]認(rèn)為桑黃多糖能夠通過蛋白激酶C（PKC）和蛋白酪氨酸激酶（PTK）途徑來刺激B淋巴細(xì)胞的增殖，通過上調(diào)NO和腫瘤壞死因子（TNF）的表達(dá)來激活T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫。此外，桑黃多糖還能促進(jìn)自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的非特異性免疫，以及輔助性T淋巴細(xì)胞Th1的功能，來加強(qiáng)細(xì)胞免疫[70-71]。 ②抑制腫瘤細(xì)胞分裂。桑黃蛋白多糖不僅可以保護(hù)T細(xì)胞免受前列腺素E2（PGE2）的抑制，加強(qiáng)免疫球蛋白A（IgA）的應(yīng)答[72]，而且可以阻斷RegⅣ介導(dǎo)的EGFR/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，而這一通路可以加速細(xì)胞的惡性增殖[73-76]；Li等[77]用桑黃多糖處理肝癌細(xì)胞，可以使細(xì)胞周期阻滯于S期，定量分析發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的鈣網(wǎng)蛋白、周期蛋白D1、周期蛋白E和周期蛋白依賴性激酶2（CDK2）的表達(dá)量明顯下調(diào)，同時周期蛋白A和p27的表達(dá)上調(diào)，說明桑黃多糖誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯是由鈣網(wǎng)蛋白和p27-cyclinA/D1/E-CDK2 信號通路介導(dǎo)；Lu等[33]發(fā)現(xiàn)桑黃酚類提取物hispolon可以有效抑制乳腺癌和膀胱癌細(xì)胞的增殖，其癌基因表達(dá)的蛋白MDM2被泛素化降解，進(jìn)而活化ERK1/2（extracellular signal-regulated 1/2）提高癌細(xì)胞對hispolon的敏感性。 ?、壅T導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。桑黃提取物hispolon可以誘導(dǎo)急性骨髓性白血病（AML）細(xì)胞凋亡，通過qRT-PCR、western blot等技術(shù)發(fā)現(xiàn)經(jīng)hispolon處理的AML細(xì)胞中，caspase-8， -9， -3的表達(dá)量明顯提高，同時ERK1/2，p38，JNK1/2的磷酸化水平增加，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系；當(dāng)使用siRNA特異性干涉JNK基因后， hispolon誘導(dǎo)的caspase-8， -9， -3活化明顯受阻；此外，hispolon降低了Bcl-2的水平，增加線粒體膜的通透性，釋放細(xì)胞色素C，從而活化caspase-9；因此，Hsiao等認(rèn)為hispolon通過2種途徑引起細(xì)胞凋亡：一方面促進(jìn)JNK1/2的磷酸化，促進(jìn)前體caspase-8， -9切割成成熟的caspase-8， -9；另一方面促進(jìn)線粒體釋放細(xì)胞色素C，活化caspase-9。成熟的caspase-8和caspase-9進(jìn)而切割下游靶蛋白，最終切割DNA成片段，引起細(xì)胞凋亡（圖4）[34-35， 78]。桑黃多糖（PL）還可以直接調(diào)控caspase 2的活性來啟動前列腺癌細(xì)胞的凋亡[79]。 3.4 保肝、抗肝硬化 在2002年，張萬國等[80]就曾證明桑黃能減輕肝細(xì)胞損傷，預(yù)防大鼠肝纖維化的發(fā)生；隨后研究發(fā)現(xiàn)桑黃能顯著改善肝臟微循環(huán)，增加肝細(xì)胞營養(yǎng)補(bǔ)給；提高肝組織SOD活性，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA；促進(jìn)肝細(xì)胞再生；抑制肝星狀細(xì)胞（HSC）和成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成；提高大鼠血清γ-干擾素水平，并且促進(jìn)了外周血單個核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞生成γ-干擾素，抑制炎癥因子IL-4水平，且呈濃度依賴性特征[81-82]。Wang等[83]以TAA誘導(dǎo)大鼠肝纖維化，觀察桑黃多糖對大鼠蛋白組學(xué)指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)包括肌動蛋白在內(nèi)的13種蛋白表達(dá)量有明顯改變；隨后對這些蛋白進(jìn)行分類，發(fā)現(xiàn)這些蛋白分別參與氧化應(yīng)激反應(yīng)、亞鐵血紅素和鐵代謝、半胱氨酸代謝、支鏈氨基酸代謝、能量代謝以及谷胱甘肽代謝，指出桑黃多糖抗肝纖維化至少要通過2種途徑，一種途徑是下調(diào)free-heme等鐵相關(guān)自由基抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)；另一種途徑是調(diào)節(jié)氨基酸和核酸代謝，提高谷胱甘肽（GSH）水平加強(qiáng)肝組織抗氧化能力。 3.5 消炎、止痛 桑黃的乙醇提取物有消炎和止痛功效[84]；Chang等[85]對其機(jī)理做了探究，發(fā)現(xiàn)hispolon不僅可以緩解小鼠足趾水腫和疼痛，同時提高了肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽還原酶（GRx）的活性，并且顯著降低了小鼠體內(nèi)丙二醛（MDA）、一氧化氮和TNF-α水平。隨后，Huang等[86]用另一種也具有該活性的桑黃提取物inotilone進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，inotilone還能降低一氧化氮合酶、轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、環(huán)氧酶-2、MAPK和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-9的活性。因此，Huang認(rèn)為，inotilone發(fā)揮消炎活性首先要抑制TNF-α和NO的合成，進(jìn)而使MDA水平降低和SOD等抗氧化酶水平升高。 3.6 抑菌 桑黃菌絲體甲醇、正丁醇提取物和發(fā)酵液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌均有一定的抑制作用，且對金黃色葡萄球菌的抑菌活性表現(xiàn)出較好的熱穩(wěn)定性[87]。桑黃子實(shí)體的乙醇提取物對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有良好的抑制作用[88]。Won-Gon Kim等[89]從桑黃中提取到一種新的三聚體hispidin，可以有效抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的烯酰-ACP還原酶的活性，從而達(dá)到抑菌目的。Lee等[90]用桑黃乙醇提取物（PBE）處理巨噬細(xì)胞，PBE能顯著抑制流產(chǎn)布魯氏菌Br. abortus的浸染，并且引起ERK1/2磷酸化水平和F肌動蛋白聚合（F-actin polymerization）下調(diào)，Lee認(rèn)為PBE通過阻斷流產(chǎn)布魯氏菌的胞內(nèi)ERK1/2-MAPKs信號通路來抑制其在宿主內(nèi)的增殖。 3.7 降糖 桑黃多糖可以顯著降低血糖水平，并且呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系[89]，并降低丙氨酸轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性[90]。Cho E J等[91]發(fā)現(xiàn)桑黃胞外多糖可以顯著提高過氧化物酶體增殖劑激活受體γ（PPAR-γ）的表達(dá)量。PPAR-γ屬于核受體蛋白超家族，具有轉(zhuǎn)錄因子的功能，其參與胰島素的降糖作用，提高機(jī)體對胰島素的敏感性[92-94]；Kim等[95]以小鼠為材料，發(fā)現(xiàn)桑黃多糖飼喂過的小鼠，與對照小鼠相比，其血糖含量顯著降低，胰島細(xì)胞受到淋巴細(xì)胞的浸潤程度較輕，并且炎癥相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ等表達(dá)受到抑制。桑黃的酚類提取物hispidin可以有效清除細(xì)胞內(nèi)的活性氧基團(tuán)，防止過氧化氫對胰島β細(xì)胞的損傷，從而提高胰島素的分泌量[95-96]。 3.8 抗誘變、抗突變 以環(huán)磷酰胺致畸處理小鼠后，飼喂桑黃多糖的小鼠骨髓微核率和精子畸形率較對照組顯著下降，并且呈明顯的劑量依賴關(guān)系。其機(jī)制可能與提高機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)，防止有害自由基對細(xì)胞內(nèi)生物大分子的損傷，抑制脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物有關(guān)[91-93]；桑黃的乙醇提取物能有效抑制疊氮化鈉（NaN3）、單功能烷化劑甲基硝基亞硝基胍（N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine，MNNG）等誘導(dǎo)的基因突變，其抗突變作用與其抗氧化活性有關(guān)[36， 94]。 3.9 其他活性及機(jī)制 P. baumii的乙醇提取物可以降低CD3+（T cells），CD19+（B cells），CD4+（T-helper），CD8+（T-cytotoxic），MHC class Ⅱ/CD11c+ （antigen-presenting cells），CD4+/CD25+（activated T-helper）等免疫相關(guān)蛋白的表達(dá)，抑制白細(xì)胞向紅腫部位的募集，同時減少TNF-α，IL-1β和IL-6細(xì)胞因子以及免疫球蛋白IgG的釋放，從而緩解小鼠的關(guān)節(jié)炎[95]。桑黃多糖還可以治療敗血性休克和抗肺炎，Kim認(rèn)為其機(jī)制可能與多糖降低血清中IL-1β，IL-12，TNF-α和下調(diào)MHCⅡ水平有關(guān)[95-96]。 4 活性成分提取工藝 4.1 多糖提取 桑黃多糖的提取方法主要有熱水浸提法、吸附法、深層發(fā)酵法、微波提取法酶提法以及超聲法[15]；游慶紅等[97]提出的水提法最佳提取工藝為固定液固比20.8∶1 （mL?g-1），99 ℃提取7.05 h，提取率達(dá)到1.133%。為進(jìn)一步優(yōu)化提取條件，研究者嘗試其他方法如超聲波提取法、超聲波輔助復(fù)合酶提取法[98-99]?；诶w維素酶可以切斷細(xì)胞壁的β-（1，4）糖苷鍵，增加細(xì)胞壁的通透性，而不破壞藥效成分，程偉對超聲波協(xié)同纖維素酶法進(jìn)行了工藝優(yōu)化：超聲溫度54 ℃，pH 5.1，超聲時間39 min，超聲功率240 W。多糖得率可達(dá)到5.30%，較水提法或超聲波提取法的多糖得率顯著提高[100]。 4.2 黃酮提取 夏國華[101]用正交試驗對桑黃總黃酮的超聲提取工藝進(jìn)行了分析，結(jié)果表明影響提取率的首要因素是提取時間，其次為料液比、乙醇濃度、提取溫度。得出最佳提取工藝為70%乙醇，提取溫度45 ℃，料液比1∶30，提取時間45 min。陳曉平等[102]利用響應(yīng)面法對微波輔助乙醇提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，得出影響總黃酮提取含量的各因素大小順序為：提取時間>微波時間>微波功率>乙醇體積分?jǐn)?shù)。最佳提取條件為：微波時間62 s、微波功率550 W、乙醇體積分?jǐn)?shù)68%、提取時間2.17 h，該條件下桑黃總黃酮提取含量為29.96 mg?g-1。 4.3 三萜提取 梁佳等[103]對三萜的微波提取法進(jìn)行了優(yōu)化，得出最佳提取條件為乙醇濃度80%、提取時間10 min、微波功率為600 W，此條件下提取液中三萜類化合物的提取量可達(dá)1.48 mg?g-1；于小鳳等[104]用響應(yīng)面法對桑黃三萜的超聲提取法進(jìn)行了優(yōu)化：70%乙醇作為提取溶劑、料液比為1∶20（g?mL-1），于60 ℃超聲提取21 min，總?cè)铺崛÷蔬_(dá)到了9.80 mg?g-1。 4.4 多酚提取 目前關(guān)于桑黃有效成分多酚提取工藝研究并不是很多。2012年，馮子旺等[105]采用單因素試驗和正交試驗對多酚的超聲提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。綜合分析影響多酚得率的各因素后，得出多酚的最佳提取工藝為60%乙醇，超聲時間30 min，超聲溫度50 ℃，料液比為1∶25，在此條件下，桑黃總多酚的提取率可達(dá)到26.4 mg?g-1。 5 存在問題及展望 桑黃作為一種安全、有效、無毒副作用的藥物，越來越受到科研及臨床工作者的關(guān)注。近年來，有關(guān)桑黃的藥理學(xué)作用、成分和機(jī)制逐漸得到闡明，提升了桑黃的利用率和產(chǎn)率。同時，也存在一些亟待解決的問題：①有關(guān)桑黃藥效成分的試驗僅是在體外環(huán)境下針對細(xì)胞系，或小鼠等動物進(jìn)行，尚沒有進(jìn)入臨床試驗階段；②桑黃的各種有效成分針對一種疾病是否具有協(xié)同效果或其他相互作用。相信當(dāng)這些問題得到解決后，桑黃類藥物的大規(guī)模生產(chǎn)、利用和普及將會有一個大幅度提高。 [參考文獻(xiàn)] [1] Sasaki T， Arai Y， Ikekawa T， et al. 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This review summarized the progress on the studies of Phellinus Quel in recent years， including its taxonomy status， bioactive components， pharmacodynamics， separation and purification technologies. In addition， some related problems and perspectives were also discussed. [Key words] Phellinus； taxonomy； bioactive components； anti-tumor； pharmacodynamics； extraction doi：10.4268/cjcmm20141510 [責(zé)任編輯 孔晶晶] |
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