背景

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一系列肝臟疾病，包括單純性脂肪肝到非酒精性脂肪性肝炎（NASH），這是一種炎癥引起的肝臟損傷。與NASH相關(guān)的一些危險(xiǎn)因素是肥胖、胰島素抵抗、2型糖尿病、高膽固醇血癥和代謝綜合征。然而，除了單核苷酸多態(tài)性、巨噬細(xì)胞功能障礙和肝臟脂肪生成外，表觀(guān)遺傳改變，包括轉(zhuǎn)錄后修飾，也參與NASH的發(fā)生和進(jìn)展。

干姜苓術(shù)湯（GJLZ）是一種經(jīng)典的中草藥處方，可用于治療包括肝脂肪變性在內(nèi)的代謝性疾病。雖然GJLZ湯在臨床上已被廣泛應(yīng)用了數(shù)千年，但GJLZ湯治療NASH的機(jī)制尚未完全闡明。

目的

從表觀(guān)遺傳學(xué)的角度探討GJLZ湯對(duì)NASH的治療作用及其機(jī)制。

方法

對(duì)GJLZ湯劑中化學(xué)成分進(jìn)行了質(zhì)量控制。通過(guò)給C57BL/6J小鼠喂食缺乏膽堿的高脂飲食（CDHFD），并給予GJLZ湯干預(yù)4周，誘導(dǎo)小鼠發(fā)生NASH。然后檢測(cè)NASH表型包括組織學(xué)脂肪變性、炎癥、肝細(xì)胞凋亡、纖維化、血清肝酶和脂質(zhì)水平。進(jìn)行N6 -甲基腺苷（m6A）和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。采用定量聚合酶鏈反應(yīng)、免疫熒光、基因敲除、油紅O染色和western blotting檢測(cè)甲基轉(zhuǎn)移酶及不同基因的水平和功能。

GJLZ煎劑能顯著減輕大鼠肝臟重量、降低肝臟指數(shù)，改善肝脂肪變性和炎癥，抑制肝細(xì)胞凋亡和纖維化。GJLZ煎劑顯著降低小鼠乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平，抑制白細(xì)胞介素6和腫瘤壞死因子α水平。

轉(zhuǎn)錄組和m6A測(cè)序揭示了NASH及后續(xù)GJLZ湯干預(yù)對(duì)轉(zhuǎn)錄組和m6A修飾的影響。鑒定出11個(gè)差異基因，GJLZ顯著提高UDP葡萄糖醛酸糖基轉(zhuǎn)移酶家族2成員A3 （Ugt2a3）的m6A水平，促進(jìn)其表達(dá)。此外，GJLZ顯著促進(jìn)甲基轉(zhuǎn)移酶14 （METTL14）的表達(dá)，而METTL14的敲低加重了肝細(xì)胞脂肪變性。最后，METTL14敲低可顯著降低Ugt2a3的水平，促進(jìn)其降解，而Ugt2a3過(guò)表達(dá)可顯著抑制肝細(xì)胞脂肪變性。