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一、 細(xì)胞培養(yǎng)基 雜交瘤技術(shù)中使用的細(xì)胞培養(yǎng)基主要有RPMI-1640或DMEM（Dulberco Modified Eagles Mediμm）兩種基礎(chǔ)培養(yǎng)基，具體配制方法按廠家規(guī)定的程序，配好后過(guò)濾除菌（0.22μm），分裝，4℃保存。
（1）不完全RPMI-1640培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基原液96mL
100×L.G.溶液1mL
雙抗溶液1mL
7.5% NaHCO3溶液1-2mL
HEPES溶液1mL
（2）不完全DMEM培養(yǎng)基：DMEM 13.37g
超純水或四蒸水980mL
NaHCO3 3.7g
雙抗溶液10mL
100×L.G.溶液10mL
用1mol/L HCl調(diào)試PH至7.2-7.4，過(guò)濾除菌，分裝4℃保存。
（3）完全RPMI-1640或DMEM培養(yǎng)基： 不完全RPMI-1640或DMEM培養(yǎng)基80mL 小牛血清15-20mL 用于骨髓瘤細(xì)胞SP2/0和建株后的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
（4）HT培養(yǎng)基：完全RPMI-1640或DMEM培養(yǎng)基99mL
HT貯存液1mL
（5）HAT培養(yǎng)基：完全RPMI-1640或DMEM培養(yǎng)基98mL
HT貯存液1mL
A貯存液1mL
二、 氨基喋呤（A）貯存液（100×，4×10-5mol/L） : 稱取1.76mg氨基喋呤（Aminopterin MW 440.4），溶于90mL超純水或四蒸水中，滴加1mol/L NaOH 0.5mL中和，再補(bǔ)加超純水或四蒸水至100mL。過(guò)濾除菌，分裝小瓶（2mL/瓶），-20℃保存。
三、 次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）貯存液(100×,H:10-2mol/L，T：1.6×10-3mol/L): 稱取136.1mg次黃嘌呤(Hypoxanthine,MW 136.1)和38.8mg胸腺嘧啶核苷(Thymidine,MW 242.2)，加超純水或四蒸水至100mL，置45-50℃水浴中使完全溶解，過(guò)濾除菌，分裝小瓶（2mL/瓶），-20℃凍存。用前可置37℃加溫助溶。
四、 L-谷氨酰胺（L.G.）溶液（100×，0.2mol/L） : 稱取2.92g L-谷氨酰胺（L-glutamine，MW 146.15），用100mL不完全培養(yǎng)液或超純水（或四蒸水）溶解，過(guò)濾除菌，分裝小瓶（4-5mL/瓶），-20℃凍存。
五、 青、鏈霉素（雙抗）溶液（100×）: 取青霉素G（鈉鹽）100萬(wàn)單位和鏈霉素（硫酸鹽）1g，溶于100mL滅菌超純水或四蒸水中，分裝小瓶（4-5mL/瓶），-20℃凍存。
六、 7.5% NaHCO3溶液 : 稱取分析純NaHCO3 7.5g，溶于100mL超純水或四蒸水中，過(guò)濾除菌，分裝小瓶（4-5mL/瓶），蓋緊瓶塞，4℃保存。
七、HEPES溶液（1mol/L）: 稱取23.83g HEPES（N-2-Hydroxyethylpiperazine-N，-2-ethanesulfonic acid，N-2-羥乙基哌嗪- N，-2-乙基磺酸，MW 238.3）溶于100mL超純水或四蒸水中，過(guò)濾除菌，分裝小瓶（4-5mL/瓶），4℃保存。
八、 8-氮鳥(niǎo)嘌呤貯存液（100×）: 稱取200mg 8-氮鳥(niǎo)嘌呤（8-azaguanine，MW 152.1），加入4mol/L NaOH 1mL，待其溶解后，加入超純水或四蒸水99mL，過(guò)濾除菌；分裝小瓶，-20℃凍存。使用時(shí)按1%濃度加入到培養(yǎng)液中（即終濃度為20μg/mL）。
九、 50% PEG: 稱取PEG 1000 或4000 20-50g于三角瓶中，蓋緊，60-80℃水浴融化，0.6mL分裝于青霉素小瓶中，高壓蒸汽20分鐘滅菌，-20℃存放備用。臨用前加熱融化，加等量不完全培養(yǎng)基，用少許7.5% NaHCO3調(diào)PH至8.0，或購(gòu)買Sigma或Gibco公司現(xiàn)成產(chǎn)品。 十、0.1 M NaOH： 0.4 g NaOH 溶于100 mL水，過(guò)濾除菌 十一、1 M HCl： 10 mL 濃鹽酸 加110 mL水，過(guò)濾除菌 
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