20世紀(jì)80年代前，世界衛(wèi)生組織（WHO）一直將心肌酶譜活性作為急性心肌梗死（AMI）的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。20世紀(jì)80年代末，科研人員發(fā)現(xiàn)，肌鈣蛋白（troponin,Tn）的敏感性和特異性高于磷酸肌酸激酶（CK）、磷酸肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脫氫酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等標(biāo)志。心肌肌鈣蛋白I(cTnI)可檢出微小心肌損害，成為心肌細(xì)胞損傷敏感性和特異性最強(qiáng)的標(biāo)志物之一，是公認(rèn)的快速診斷AMI和急性冠脈綜合征（acute coronary syndromes, ACS），以及協(xié)助ACS危險(xiǎn)分層和反映其預(yù)后的主要生化標(biāo)志。

CTnI的物生學(xué)特性

 Tn是由TnI、TnT和TnC三個(gè)亞單位組成，其中TnI是抑制性亞單位，可抑制肌球蛋白與肌動(dòng)蛋白組合，阻止肌肉收縮，TnT是與原肌球蛋白結(jié)合的亞單位；TnC是與鈣離子結(jié)合的受體。

1， CTnI的心肌特異性和抗原性

TnI有三種亞型：分子量分別為24kD的cTnI,20kD的快骨骼肌和慢骨骼肌肌鈣蛋白I（sTnI）。CTcI與sTnI的氨基酸序列有40%的異源性，cTnI氨基端有31個(gè)氨基酸是sTnI所不具有的；兩者在人體中的含量相差也較大，cTnI為5.7±0.6mg/g, sTnI為8.4±2.7μg/g，比值為680±75；cTnI與sTnI的交叉反應(yīng)最早認(rèn)為是2%，后來(lái)由于檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，交叉反應(yīng)已降至0.007%。在出生9個(gè)月后，新生兒心肌中僅存cTnI，且無(wú)任何亞型。在個(gè)體發(fā)生的全過(guò)程中，無(wú)論骨骼肌受到任何病理刺激，均不表達(dá)cTnI,,所以cTnI具有高度的心肌特異性。人cTnI有五個(gè)螺旋區(qū)域，呈伸展式構(gòu)型。抗體識(shí)別相應(yīng)抗原表位不依賴于蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)，使nTnI氨基酸序列易被免疫系統(tǒng)識(shí)別，故cTnI具有較強(qiáng)的抗原性。

2，cTnI的存在方式

cTnI大部分以CTnI-CTnC復(fù)合物形式存在于心房肌和心室肌細(xì)胞的胞質(zhì)中，3%的CTnI游離于心肌細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，在心肌細(xì)胞膜完整狀態(tài)下，cTnI不能透過(guò)細(xì)胞膜入血循環(huán)。當(dāng)心肌損傷時(shí)，外周血中90%以上的cTnI，仍然以cTnI-cTnC復(fù)合物形式存在，游離的cTnI較少。

CTnI的檢測(cè)方法及其影響因素

CTnI的測(cè)定方法很多，1987年Commins采用多克隆抗體建立放射免疫分析法檢測(cè)cTnI濃度，最低檢測(cè)濃度為10μg/L，與sTnI只有2%的交叉反應(yīng)，檢測(cè)時(shí)間為24-36h。Larued等應(yīng)用的cTnI單抗酶免疫檢測(cè)法，最低濃度為0.2μg/L，并與sTnI無(wú)交叉反應(yīng)，檢測(cè)時(shí)間為30min以內(nèi)，明顯優(yōu)于Commins法。為了使檢驗(yàn)更便捷，有研究者將金標(biāo)記或硒標(biāo)記單克隆抗體與免疫層析技術(shù)相結(jié)合，用紙條法定量或半定量床邊檢測(cè)cTnI濃度，根據(jù)測(cè)試紙條上線條是否呈紅色來(lái)制定cTnI濃度，最低檢測(cè)值為0.4μg/L。臨床上常用的方法有：

1，Stratus檢測(cè)法

Stratus檢測(cè)法是一種先進(jìn)的自動(dòng)雙位點(diǎn)熒光酶免疫定量檢測(cè)法，使用兩種cTnI單克隆抗體，特異性高，靈敏度為0.35μg/L。當(dāng)AMI臨界值為1.5μg/L時(shí)，不精密性（CV）小于或等于10%，檢測(cè)時(shí)間為10min。

2，AxSYM檢測(cè)法

AxSYM檢測(cè)法是一種近幾年來(lái)才開(kāi)始應(yīng)用的cTnI檢測(cè)法，它的基本原理與Stratus法有相似之處，是一種以特異性cTnI單克隆抗體為捕獲抗體，以cTnI多克隆抗體作酶標(biāo)記抗體，建立兩步夾心酶免疫法，檢測(cè)游離cTnI和復(fù)合體中cTnI。該法首先將包被著cTnI單克隆抗本的微粒、堿性磷酸酶（SLP）標(biāo)記的cTnI多克隆抗體以及標(biāo)本中的cTnI相混合，然后加入底物MUP（4-methylum-bellifery 1 phosphate），產(chǎn)生熒光物質(zhì)的比率與樣本中cTnI的濃度有關(guān)，該方法與Stratus檢測(cè)法有顯著相關(guān)性（r=0.88）即AxSYM=3.50（Stratus檢測(cè)法）-1.10，兩種方法對(duì)AMI檢測(cè)的一致性為95.3%。該方法靈敏度為0.14±0.05μg/L，POC曲線所確定的AMI臨界值為2.0μg/L；總不精密性為6.3%-10.2%，檢測(cè)時(shí)間為15-20min。

3，RxL-HM檢測(cè)法

RxL-HM檢測(cè)法是以兩個(gè)特異性的單克隆抗體為基礎(chǔ)的一步酶免疫檢測(cè)法，檢測(cè)時(shí)間為17min，靈敏度為0.1μg/L，方法簡(jiǎn)便。ELISA快速定量檢測(cè)cTnI所需時(shí)間為10min，靈敏度為0.01μg/L，診斷AMI的閾值為0.15μg/L，初始敏感度為63%。延長(zhǎng)至4H后敏感度提高至98%，比Stratus檢測(cè)法（初始和4h后敏感度分別為48%和85%）更敏感，且能提供更好的預(yù)后信息。

4，CTnI檢測(cè)方法影響因素

應(yīng)當(dāng)注意的是，雖然cTnI的檢測(cè)方法很多，但因其定量測(cè)定受到許多因素的影響，各種檢測(cè)方法有著不同的臨界值，各種檢測(cè)結(jié)果之間最大可相差達(dá)36倍。其原因有以下幾個(gè)：（1）無(wú)論是在患者的血流中，還是在全血或血清標(biāo)本中，cTnI均會(huì)有不同程度的降解，游離和復(fù)合物形式的cTnI及其降解片段結(jié)構(gòu)各異，各種檢測(cè)方法使用針對(duì)不同抗原決定簇的cTnI抗體，其免疫反應(yīng)必然各不相同。已用研究發(fā)現(xiàn)，雖然cTnI的N末端和C末端的抗原性很強(qiáng)，但無(wú)論是在血清還是在壞死的心肌組織中，都極易被蛋白酶快速水解，而中央?yún)^(qū)（30-100氨基酸序列）卻有較高的穩(wěn)定性，故建議選擇能夠優(yōu)先識(shí)別這些比較穩(wěn)定的氨基酸序列的抗體，被認(rèn)為有助于cTnI免疫檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化以及有利于提高特異性和敏感性；（2）由于多數(shù)單克隆抗體不能與cTnI-cTnC復(fù)合物結(jié)合，為了達(dá)到快速檢測(cè)相應(yīng)抗原的目的，常使用EDTA(Ca+螯合劑)等抗凝劑，解離cTnI-cTnC復(fù)合物，促使單抗與cTnI結(jié)合，但若這些抗凝劑應(yīng)用不當(dāng)也會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果；（3）溶血或高膽紅素血癥以及風(fēng)濕等因素對(duì)cTnI測(cè)定也有一定的影響，有的可能會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果；（4）缺少統(tǒng)一的校正標(biāo)準(zhǔn)品。最近在歐洲心臟病學(xué)會(huì)（ESC）和美國(guó)心臟病學(xué)院（ACC）組織的會(huì)議上，生物化學(xué)小組專家已提出應(yīng)盡快通過(guò)檢測(cè)cTnI標(biāo)準(zhǔn)化來(lái)解決上述問(wèn)題。

CTnI檢測(cè)的臨床意義

1，急性冠脈綜合征的臨床診斷、預(yù)后估計(jì)和危險(xiǎn)分層

ACS是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊脫落、血小板聚集、血栓形成、心肌缺血和心肌壞死等臨床病理生理改變引起的一系列臨床癥狀，它包括了不穩(wěn)定性心絞痛和AMI等各種因冠脈狹窄、阻塞引起心肌缺血以至梗死的綜合癥狀。

目前，公認(rèn)的早期心肌損傷的生化標(biāo)志物主要限于肌紅蛋白（myoglobin, Mb）和CK-MB， WHO對(duì)AMI診斷標(biāo)準(zhǔn)已有了許多修改。由于CK-MB、CK和Mb不僅存在于心肌組織中，也存在于非心肌組織中。在骨骼肌受損傷時(shí)，它們可不同程度的升高。另外，CK-MB在血中存在的時(shí)間較短（1-4天）。CTn濃度的敏感性和特異性高于CK-MB、CK和Mb等酶標(biāo)志物，患者發(fā)病后cTn出現(xiàn)較早，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，是目前診斷心肌損傷較好的確定標(biāo)志物。此外作為T(mén)n之一的cTnT在慢性腎衰、橫紋肌溶解、肺炎、敗血癥患者也呈不同程度的增高。而且cTnT分子量大于cTnI。故意在AMI發(fā)生后，cTnT釋放入血時(shí)間比cTnI延遲，而cTnI卻有其獨(dú)特的心肌特異性和診斷窗口期較長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)。

在AMI初期，cTnI的敏感性略遜于Mb、CK-MB；在AMI出現(xiàn)癥狀后4h，cTnI、Mb和CK-MB的敏感性分別為96.9%、100%和92.3%；但此時(shí)cTnI的特異性和ROC效率最高，分別為100%和95.6%，而Mb為46%和56%，CK-CB為78%和81%；當(dāng)出現(xiàn)癥狀后10-70h，cTnI的敏感性、特異性和ROC均為100%。國(guó)外有學(xué)者已指出，一定要在AMI出現(xiàn)癥狀后6-9h，采血檢驗(yàn)cTnI，這一點(diǎn)至關(guān)重要。Mb和CK-MB的最大敏感度則分別在AMI出現(xiàn)的2-8h和7-24h；在70h，二者的敏感度下降了，分別為20%和37%。所以，無(wú)論在AMI早期，還是晚期，cTnI都是一個(gè)敏感性和特異性較高的指標(biāo)?；赾TnI以上特點(diǎn)，國(guó)外對(duì)懷疑AMI的患者，早期做cTnI、Mb和CK-MB三項(xiàng)血清學(xué)檢查。Mb作為過(guò)篩試驗(yàn)，cTnI陽(yáng)性和CK-MB陰性者為高?；颊?；cTnI和CK-MB均陰性，臨床癥狀可疑者，需做3h、6h、9h和12h血cTnI動(dòng)態(tài)觀察，而cTnI其診斷窗口期最長(zhǎng)，可達(dá)7-9天。

CTnI不僅有助于早期診斷AMI，并對(duì)其預(yù)后估計(jì)和危險(xiǎn)分層也有一定的幫助。有研究證實(shí)，cTnI在AMI癥狀出現(xiàn)后12h，對(duì)危險(xiǎn)分層最為適宜。Maisel等將cTnI和2h-Mb作為CK-MB的輔助手段，對(duì)505例胸痛患者的AMI作出判斷，結(jié)果表明cTnI+2h-Mb二者同cTnI+2h-Mb+CK-MB三者聯(lián)合早期診斷AMI，結(jié)果同樣準(zhǔn)確。所以cTnI+2h-Mb檢測(cè)可節(jié)省費(fèi)用，并且對(duì)遲發(fā)事件的估計(jì)優(yōu)于CK-MB。同時(shí)cTnI+2h-Mb對(duì)CD-MB正常者是否有并發(fā)癥的發(fā)生具有預(yù)測(cè)價(jià)值。在另一項(xiàng)研究中，通過(guò)對(duì)200名疑似AMI患者血中cTnI、CK-MB/CK活性、CK-MB和Mb檢測(cè)，并以CAS和死亡作為終點(diǎn)，進(jìn)行了6周的隨訪后表明，入院時(shí)、入院2h及4h 檢測(cè)患者cTnI+Mb，對(duì)AMI的診斷價(jià)值高于單獨(dú)檢測(cè)Mb。而cTnI+CK-MB/CK活性對(duì)6周后死亡或AMI的發(fā)生具有獨(dú)立預(yù)測(cè)價(jià)值，但CK-MB/CK活性和Mb則沒(méi)有預(yù)測(cè)價(jià)值。Fleming等將cTnI小于0.1μg/L的95例患者，靜息ECG正常的急性胸痛患者，分成兩組，一組cTnI小于0.03μg/L，另一組cTnI為0.03-0.099μg/L，隨訪172天，結(jié)果顯示；cTnI輕微升高的19例患者中，有5例ECG的ST段顯著升高，5例病情惡化；而cTnI正常者中，無(wú)上述情況出現(xiàn)，認(rèn)為cTnI正常的患者ACS事件的發(fā)生率較低，無(wú)需進(jìn)一步行運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)心電圖檢查。

2，估計(jì)心肌梗死面積

心肌梗死的面積與心室功能的減弱和室性心率失常的發(fā)生有密切的關(guān)系，所以估計(jì)心肌梗死面積可幫助評(píng)價(jià)預(yù)后。Mair等對(duì)15例Q波性AMI患者的cTnI、CK-MB和CK的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，cTnI的釋放與心肌梗死面積相關(guān)。另有研究者將40只兔子隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，對(duì)實(shí)驗(yàn)組兔子的左前降支（LAD）夾閉后造成心肌梗死模型，對(duì)心肌梗死的面積和cTnI抗體空白區(qū)面積進(jìn)行組織學(xué)研究。發(fā)現(xiàn)cTnI抗體空白區(qū)面積包括了所有缺血區(qū)的面積，這兩者面積呈強(qiáng)相關(guān)性（r=0.95）；釋放的cTnI總量與心肌梗死的面積和cTnI抗全空白區(qū)面積呈線性相關(guān)，AMI后9h相關(guān)性最好（r=0.45和0.47），AMI后9h cTnI的濃度可估計(jì)心肌梗死的面積。

3，監(jiān)測(cè)心臟手術(shù)造成的心肌損傷

由于cTnI對(duì)檢測(cè)微小心肌損傷具有較高的敏感性和特異性，可用于心臟圍手術(shù)期的監(jiān)測(cè)。已有研究表明，cTnI是冠脈成形術(shù)后微小心肌損傷非常敏感的標(biāo)志物，與支架是否置入無(wú)關(guān)。在cTnI不正常的患者中，有38%的患者在支架置入術(shù)后發(fā)生分支閉塞。Harris等對(duì)cTnI、cTnI和CK-MB在檢測(cè)經(jīng)皮穿刺冠狀動(dòng)脈成形術(shù)（PTCA）、支架術(shù)（stent）、冠脈動(dòng)脈內(nèi)斑塊旋切術(shù)（RA）等心臟介入手術(shù)后心肌損害的敏感性進(jìn)行比較，同樣發(fā)現(xiàn)，cTnI對(duì)術(shù)后微小心肌損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值最高，但發(fā)現(xiàn)將cTnI濃度為0.1μg/L定為臨界值，可能過(guò)于敏感，并將在以后的隨訪中進(jìn)一步研究cTnI輕微升高的臨床意義。

心源性猝死的高?；颊叱Ｐ柚萌肼癫厥阶詣?dòng)復(fù)律除顫器（ICD），為了確保ICD功能正常，必須對(duì)其除顫功能進(jìn)行檢驗(yàn)，因?yàn)橹绷麟姄粼诮K止室顫的同時(shí)，導(dǎo)致微小的心肌損傷，使cTnI短暫釋入血，其釋放與電擊的次數(shù)和有效性有關(guān)，cTnI、cTnT和CK-MB在電擊后明顯升高，高峰出現(xiàn)在電擊后4h。

4，某些藥物治療的臨床療效觀察

已有研究將cTnI用于糖蛋白ⅡbⅢa受體抑制劑療效的觀察，而cTnI卻難以確定哪些患者受益于ⅡbⅢ受體抑制劑。

5，非缺血性心衰心肌溶解的檢測(cè)

有研究通過(guò)檢測(cè)cTnI來(lái)評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞溶解在非缺血性心衰中的作用。結(jié)果表明，cTnI升高與二尖瓣活動(dòng)受限、左室向心性重塑以及左室壁張力的相關(guān)生化標(biāo)志物（如增高的心鈉素）有關(guān)，認(rèn)為微小的心肌溶解可能部分與左室張力的顯著增加有關(guān)，認(rèn)為cTnI將是檢測(cè)非缺血性心衰的心肌溶解，非常有發(fā)展前景的方法。

6，原發(fā)性高血壓病左室肥厚的新標(biāo)志

Siciliano等對(duì)原發(fā)性高血壓病伴左室肥厚組、原發(fā)性高血壓病無(wú)左室肥厚組和正常對(duì)照組的cTnI進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，第一組的23例患者中，有12例cTnI大于正常高限值（0.5μg/L），后兩組的cTnI均低于0.5μg/L，三組的cTnI均值分別為0.88±0.93μg/L、0.27±0.8μg/L、0.22±0.4μg/L，有顯著差異。認(rèn)為血清cTnI濃度是原發(fā)性高血壓患者左室肥厚的新標(biāo)志。

骨骼肌損傷或慢性腎衰伴有心肌損傷的鑒別

由于CK-MB、CK和Mb不僅存在于心肌組織中，也存在于非心肌組織中，在骨骼肌損傷或慢性腎衰時(shí)，可不同程度的升高；作為T(mén)n之一的cTnI在慢性腎衰、橫紋肌溶解患者中也常呈不同程度的增高，而cTnI具有唯一的心肌特異性，可鑒別骨骼肌損傷或慢性腎衰患者是否伴有心肌損傷。