【原】【期刊導(dǎo)讀】鐵調(diào)素與聚乙二醇干擾素α治療慢乙肝患者的療效有關(guān)

雨露肝霖 2024-08-26 發(fā)布于福建

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編者按：鐵調(diào)素 (Hepcidin) 是由肝臟產(chǎn)生的鐵調(diào)節(jié)激素。在慢性丙型肝炎患者中，已有研究表明血清鐵調(diào)素與聚乙二醇干擾素α（PEG IFN-α）的治療療效有關(guān)。然而，慢乙肝患者血清鐵調(diào)素表達(dá)水平與干擾素α治療療效間的關(guān)系尚不清楚。

近期，安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科王琴教授和安徽醫(yī)科大學(xué)肝臟疾病研究所呂雄文教授團(tuán)隊(duì)在International Immunopharmacology上發(fā)表的一項(xiàng)研究顯示：PEG IFN-α治療早期血清鐵調(diào)素水平越高，患者HBsAg和HBV DNA下降的可能性越大，提示PEG IFN-α治療早期血清鐵調(diào)素水平高對預(yù)測慢乙肝患者療效有重要意義。

研究方法

納入2020年1月至2021年6月在安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院接受PEG IFN-α治療48周的慢乙肝患者。在治療前和治療期間采集受試者的血清樣本。用ELISA法測定血清鐵調(diào)素水平，用RT-PCR法檢測鐵調(diào)素基因表達(dá)水平的變化情況，用免疫熒光細(xì)胞染色檢測鐵調(diào)素蛋白表達(dá)情況。通過免疫印跡法分析抗病毒蛋白的誘導(dǎo)作用。通過受試者工作特征 (ROC) 曲線分析評估治療過程中血清鐵調(diào)素早期治療變化的預(yù)測價(jià)值。

患者特征

研究共納入47例慢乙肝患者，其中男性38例，女性9例，平均年齡37 ± 8歲 (范圍：21-56歲)。PEG IFN-α治療后，44.7%的患者HBV DNA降幅 > 1 log₁₀ copies/mL。同時(shí)，40.4%的患者HBsAg降幅 > 1 log₁₀ IU/mL。

慢乙肝患者臨床特征

^aP<0.05，^bP<0.01，^cP<0.0001

研究結(jié)果

PEG IFN-α治療期間，HBsAg降幅 > 1 log₁₀ IU/mL患者的血清鐵調(diào)素水平顯著更高

分析了47例患者血清鐵代謝指標(biāo)與肝功能指標(biāo)之間的關(guān)系，但兩者間無顯著相關(guān)性。值得注意的是，在PEG IFN-α治療期間，血清鐵調(diào)素水平顯著升高。與HBsAg降幅 < 1 log₁₀ IU/mL的患者相比，血清HBsAg降幅 > 1 log₁₀ IU/mL患者的血清鐵調(diào)素水平顯著更高 (P < 0.01)。與HBV DNA降幅 < 1 log₁₀ copies/mL的患者相比，HBV DNA降幅 > 1 log₁₀ copies/mL患者的血清鐵調(diào)素水平更高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。這表明血清鐵調(diào)素表達(dá)水平可能與PEG IFN-α治療慢乙肝的療效有關(guān)。

治療期間血清鐵調(diào)素水平的變化情況

**P<0.01

PEG IFN-α治療早期鐵調(diào)素水平的變化可以預(yù)測治療療效

采用ROC曲線分析來評估治療早期(12周) 血清鐵調(diào)素水平變化對預(yù)測慢乙肝患者PEG IFN-α治療效果的價(jià)值。計(jì)算曲線下面積 (AUC)，得到鐵調(diào)素的最佳cut-off值。對于預(yù)測HBsAg下降，鐵調(diào)素水平的AUC為0.762。血清鐵調(diào)素水平預(yù)測HBsAg下降的最佳cut-off值為239 pg/mL，靈敏度和特異性分別為72.73%和70.97%。對于預(yù)測HBV DNA下降，鐵調(diào)素水平的AUC為0.639，最佳cut-off值為190.4 pg/mL，靈敏度和特異性分別為72.73%和61.11%。這些數(shù)據(jù)表明，PEG IFN-α治療早期鐵調(diào)素水平的變化可以預(yù)測治療療效。

慢乙肝患者血清鐵調(diào)素水平變化的ROC曲線圖

IFN-α可誘導(dǎo)鐵調(diào)素的表達(dá)

為了進(jìn)一步測定IFN-α作用下HepG2.2.15細(xì)胞鐵調(diào)素的表達(dá)情況，研究還觀察了使用IFN-α后HepG2.2.15細(xì)胞鐵調(diào)素水平的變化。采用定量PCR方法檢測鐵調(diào)素基因 (HAMP) 表達(dá)，并采用免疫熒光法進(jìn)一步驗(yàn)證鐵調(diào)素蛋白在HepG2.2.15細(xì)胞中的表達(dá)變化。IFN-α作用48 h后HAMP的表達(dá)明顯增強(qiáng)，而且呈劑量依賴性的增長。免疫熒光細(xì)胞染色證實(shí)了鐵調(diào)素的表達(dá)。IFN-α (1000U) 處理HepG2.2.15細(xì)胞48 h后，經(jīng)免疫染色發(fā)現(xiàn)，IFN-α處理組的鐵調(diào)素陽性細(xì)胞數(shù)量明顯多于對照組，證實(shí)IFN-α可誘導(dǎo)HepG2.2.15細(xì)胞中鐵調(diào)素的表達(dá)。

不同劑量IFN-α處理后HepG2.2.15細(xì)胞

HAMP基因的表達(dá)水平

*P<0.01，**P<0.005

免疫熒光法檢測HepG2.2.15細(xì)胞中

鐵調(diào)素蛋白的表達(dá)水平

鐵調(diào)素可增強(qiáng)IFN-α的抗病毒作用

IFN-α可以上調(diào)鐵調(diào)素在體內(nèi)和體外的表達(dá)。為了進(jìn)一步證明鐵調(diào)素對IFN-α抗病毒療效的影響，研究還檢測了抗病毒蛋白MxA、IRF9和pSTAT1的表達(dá)情況。免疫印跡測定結(jié)果顯示，與IFN-α單獨(dú)作用相比，IFN-α和鐵調(diào)素共培養(yǎng)HepG2.2.15細(xì)胞后，MxA和IRF9蛋白的表達(dá)顯著上調(diào)。但STAT1蛋白的表達(dá)無顯著性差異。這些結(jié)果提示鐵調(diào)素增強(qiáng)了IFN-α的抗病毒作用。

IFN-α單獨(dú)或與鐵調(diào)素共培養(yǎng)下，HepG2.2.15細(xì)胞中

抗病毒蛋白的表達(dá)情況

肝霖君有話說

目前，基于PEG IFN-α的治療是慢乙肝患者獲得臨床治愈的最佳策略，但通過個(gè)體化治療方法可以進(jìn)一步優(yōu)化治療結(jié)局，因此對于療效預(yù)測指標(biāo)的探索尤為重要。本研究表明PEG IFN-α治療期間慢乙肝患者的鐵調(diào)素表達(dá)顯著增加，并且HBsAg降幅 > 1 log₁₀ IU/mL患者的血清鐵調(diào)素水平顯著更高，PEG IFN-α治療早期鐵調(diào)素水平的變化可以預(yù)測治療療效。對于PEG IFN-α治療慢乙肝患者機(jī)制和預(yù)測指標(biāo)的研究越來越多，但是此過程涉及復(fù)雜的免疫細(xì)胞調(diào)控，仍然需要深入探索，以進(jìn)一步幫助臨床治愈率的提升。

參考文獻(xiàn)：

Jia J, Zhang Y, Zhang H, et al. Hepcidin expression levels involve efficacy of pegylated interferon-alpha treatment in hepatitis B-infected liver[J]. Int Immunopharmacol, 2022, 107: 108641.