近日，第十三屆301呼吸疾病高峰論壇在中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院內(nèi)科大樓國(guó)際會(huì)議中心隆重召開，注冊(cè)參會(huì)的醫(yī)護(hù)人員達(dá)2000人。廣州賽哲生物有幸參會(huì)，為參會(huì)代表推廣mNGS技術(shù)在呼吸重癥中的應(yīng)用。本屆論壇創(chuàng)新地將呼吸疾病的討論按亞專科分為若干板塊，并由相關(guān)領(lǐng)域一線專家擔(dān)任版主，關(guān)注呼吸重癥與感染、腫瘤及介入、慢病康復(fù)及管理等，結(jié)合實(shí)操與臨床病例，討論熱點(diǎn)技術(shù)與重點(diǎn)話題。

其中，大會(huì)主席，解立新教授針對(duì)感染與診斷新技術(shù)，特邀解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科磨國(guó)鑫教授，通過(guò)結(jié)合賽哲生物的宏基因組檢測(cè)技術(shù)背景，帶來(lái)題為“M_ROSE聯(lián)合NGS在呼吸重癥感染診斷中的應(yīng)用與問(wèn)題”的重癥感染專題講座。

在講座中，磨教授首先表示現(xiàn)臨床面對(duì)感染壓力巨大，而因未能及時(shí)診斷而導(dǎo)致的延遲或不適當(dāng)?shù)闹委煏?huì)增加死亡率和醫(yī)療成本。目前的傳統(tǒng)檢測(cè)方法存在一定的局限性，快速準(zhǔn)確方便的診斷方法，能幫助患者早日脫離感染的風(fēng)險(xiǎn)。

磨教授介紹道，ROSE是種非常具有時(shí)效性的臨床檢測(cè)手段，通過(guò)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行實(shí)時(shí)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析，在床旁實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。優(yōu)勢(shì)就兩個(gè)字：“快”“準(zhǔn)”。傳統(tǒng)檢測(cè)需要在手術(shù)室獲取呼吸道分泌物后外送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行一系列操作檢查與微生物鑒定，而ROSE則是在床旁獲得氣管鏡標(biāo)本后，迅速涂片，染色，并在顯微鏡下判讀結(jié)果，耗時(shí)只需3-5分鐘。M_ROSE能快速判斷送檢標(biāo)本是否合格，以及初步鎖定致病原和患者免疫狀態(tài)下對(duì)應(yīng)的感染。

磨教授接著介紹mNGS技術(shù)。宏基因組病原微生物檢測(cè)是國(guó)家衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦使用的高通量測(cè)序臨床應(yīng)用之一，通過(guò)廣泛獲取標(biāo)本中病原體的全部基因序列，與已知病原數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，分析還原樣本中的病原體分布情況，比起傳統(tǒng)微生物檢測(cè)方法有更多的提升。接下來(lái)，磨教授就mNGS技術(shù)的具體技術(shù)細(xì)節(jié)，對(duì)“干”實(shí)驗(yàn)和“濕”實(shí)驗(yàn)分別進(jìn)行介紹。他表示，好的檢測(cè)公司，如賽哲生物，實(shí)驗(yàn)室會(huì)注意到每個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程細(xì)節(jié)，并進(jìn)行參數(shù)調(diào)整，研制出最適用于臨床的檢測(cè)產(chǎn)品，這就包括了針對(duì)臨床樣本的不同狀態(tài)預(yù)處理的方法，核酸提取方法對(duì)DNA、RNA檢測(cè)流程的影響，數(shù)據(jù)分析過(guò)程中數(shù)據(jù)量，數(shù)據(jù)庫(kù)的選取，mNGS檢測(cè)靈敏度等問(wèn)題。

會(huì)議主持人：張作清主任（左）與大會(huì)主席解立新主任（右）

接下來(lái)，磨教授給大家介紹M_ROSE與mNGS聯(lián)合使用時(shí)的技術(shù)細(xì)節(jié)。他尤其關(guān)注送檢流程環(huán)節(jié)。他表示，臨床的ROSE取樣技術(shù)能直接影響到后續(xù)微生物檢測(cè)的結(jié)果，他以BALF取樣舉例，介紹了包括取樣定位、灌洗液量、回收次數(shù)與處理等技術(shù)注意事項(xiàng)。除了臨床標(biāo)準(zhǔn)化取樣流程以外，磨教授還已與賽哲生物合作進(jìn)行關(guān)于ROSE技術(shù)標(biāo)本保存運(yùn)輸測(cè)試，以保證標(biāo)本質(zhì)量。

相比于傳統(tǒng)檢測(cè)的“獨(dú)桿釣魚”來(lái)說(shuō)，mNGS是一種“撒網(wǎng)捕魚”的方法。而在實(shí)際應(yīng)用中也會(huì)遇到一些問(wèn)題，如破壁、檢出閾值與數(shù)據(jù)量、解讀時(shí)的致病性判斷、感染狀態(tài)、胞內(nèi)菌/真菌的檢出率較低等，這些問(wèn)題都需要臨床與檢測(cè)公司充分溝通。不同于傳統(tǒng)報(bào)告的解讀，mNGS報(bào)告的解讀需要臨床理解整個(gè)檢測(cè)操作流程，理解測(cè)序端所發(fā)生的事件，然后再以報(bào)告與臨床癥狀進(jìn)行對(duì)接，最終找出導(dǎo)致感染的病原體真兇。找到獲得國(guó)家認(rèn)可的檢測(cè)公司，如賽哲生物，能為臨床提供專業(yè)的檢測(cè)意見。

磨教授緊接著分享了他使用ROSE與NGS結(jié)合的重癥肺炎的臨床案例。病例中，在通過(guò)ROSE，鏡下可見大量的鮑曼不動(dòng)桿菌被吞噬，微生物培養(yǎng)顯示為耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌感染，這些證據(jù)是否就可以確診為鮑曼不動(dòng)桿菌感染呢？事實(shí)上，mNGS報(bào)告結(jié)果可見除鮑曼不動(dòng)桿菌以外，還檢測(cè)出了軍團(tuán)菌。通過(guò)針對(duì)性的尿抗原檢查，患者獲得臨床上軍團(tuán)菌感染的確診。隨后，臨床覆蓋上奎羅酮類藥物，同時(shí)終止重拳猛擊的多種抗生素藥物，高效精確地縮短治療戰(zhàn)線。

最后，磨主任總結(jié)道：ROSE與mNGS聯(lián)用在呼吸重癥感染診斷中能實(shí)現(xiàn)“雙贏”：一方面，ROSE能把關(guān)取樣，縮小漫無(wú)邊際mNGS的檢測(cè)范疇；同時(shí)，mNGS能為ROSE進(jìn)行補(bǔ)充，能更精確地呈現(xiàn)ROSE所不能看到的病原體。因此，兩者結(jié)合，能夠更精確，更快速，更高效地對(duì)患者病情進(jìn)行評(píng)價(jià)并指導(dǎo)進(jìn)行及時(shí)的治療。

用微世界推動(dòng)大健康

以微生物診斷產(chǎn)品為公共衛(wèi)生事業(yè)作出貢獻(xiàn)

賽哲生物︱成就創(chuàng)業(yè)與創(chuàng)新夢(mèng)想