眾所周知,子宮內(nèi)膜癌分為激素依賴性癌和非激素依賴性癌,前者以子宮內(nèi)膜樣癌為代表;后者以漿液性癌為代表。在基因水平改變上,子宮內(nèi)膜樣癌以PTEN丟失為主要改變,而漿液性癌以P53突變?yōu)樘攸c(diǎn),PTEN甚少丟失。已有文獻(xiàn)報(bào)道,雌激素能夠促進(jìn)PTEN丟失,但機(jī)理尚不清楚。本研究小組在以往研究中發(fā)現(xiàn)一個(gè)有趣現(xiàn)象,在內(nèi)膜樣癌中,癌組織與癌旁相比,miR200c表達(dá)上調(diào),而在其他大部分腫瘤中,miRNA200c作為抑癌miRNA,癌組織中是下調(diào)的。而且生物信息學(xué)預(yù)測(cè)顯示PTEN為miR200c的靶標(biāo)基因。那么,是否內(nèi)膜樣癌中PTEN的丟失與miR200c的上調(diào)相關(guān)?雌激素是否能通過促進(jìn)miR-200c的表達(dá)而導(dǎo)致PTEN丟失?另外,尚有文獻(xiàn)報(bào)道,在前列腺、腸及腎細(xì)胞癌中,PTEN相關(guān)假基因PTENP1, 作為長鏈非編碼RNA能與miRNA結(jié)合調(diào)節(jié)PTEN的表達(dá),但在子宮內(nèi)膜樣癌中尚無研究。綜上所述,本課題組提出假設(shè),雌激素通過影響miR200c-PETENP1,抑制PTEN表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在40例子宮內(nèi)膜樣癌中,癌與癌旁比較,miR200c在癌中呈上調(diào)表達(dá),而同時(shí),PTEN和PTENP1下調(diào)。在內(nèi)膜癌細(xì)胞株中,miR200c與PTEN/PTENP1也呈相反表達(dá)關(guān)系。通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染,qRT-PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),miR200c下調(diào)PTEN和PTENP1表達(dá),PTENP1正向調(diào)節(jié)PTEN表達(dá),而逆向調(diào)控miR200c。mi200c與PTENP1間呈負(fù)反饋調(diào)節(jié)環(huán),PTEN和PTENP1間呈正反饋環(huán)調(diào)節(jié)。PTEN對(duì)PTENP1無調(diào)節(jié)作用。通過雙熒光素酶報(bào)告基因及RIP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PTEN和PTENP1同為miR200c的靶標(biāo)基因,PTENP1能逆轉(zhuǎn)miR200c對(duì)PTEN的抑制作用,并且PTENP1對(duì)PTEN的調(diào)控依賴于miR200c。進(jìn)一步,加入雌激素(E2),miR200c上調(diào),PTEN蛋白下調(diào),并且進(jìn)而促進(jìn)磷酸化PI3K-AKT通路基因表達(dá), 加入miR200c抑制劑,能夠逆反該作用。在敲除雌激素受體(ERα)的細(xì)胞株中,E2對(duì)miR200c及PTEN作用均減弱。最后,我們證實(shí),雌激素能促進(jìn)內(nèi)膜癌細(xì)胞株的侵襲遷移和增殖,而加入miR200c抑制劑后,細(xì)胞侵襲遷移和增殖能力均降低。綜上所述,筆者的結(jié)論是:雌激素通過結(jié)合ER,上調(diào)miR200c,miR200c和PTENP1間形成負(fù)反饋調(diào)節(jié)環(huán),抑制PTEN表達(dá),從而激活磷酸化PI3K-AKT通路,促進(jìn)細(xì)胞侵襲遷移和增殖能力。本研究為子宮內(nèi)膜樣癌的發(fā)生發(fā)展提供了新的分子機(jī)制。 PTEN/PTENP1與miR200c在內(nèi)膜樣癌組織和細(xì)胞株中呈反向表達(dá)關(guān)系 A. 92.5%(37/40)內(nèi)膜樣癌新鮮組織樣本顯示出miR200c在癌組織中比周圍正常組織高表達(dá)。B. 67.6%(25/37)樣本顯示PTEN表達(dá)癌比周圍組織低。C. 92.6%(25/27)樣本顯示PTENP1表達(dá)癌比正常組織低。D. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示在內(nèi)膜樣癌中PTENP1和PTEN的表達(dá)與miR200c呈相反關(guān)系。E. 免疫組化示PTEN在正常內(nèi)膜中間質(zhì)和腺體均陽性表達(dá),而在大多數(shù)復(fù)雜非典型增生和癌腺體中丟失,間質(zhì)陽性。F. GEO數(shù)據(jù)庫分析證明miR200c在癌中高表達(dá)。G.TGCA數(shù)據(jù)庫分析http://ualcan.path./analysis.html)證實(shí)546例內(nèi)膜樣癌中PTEN低表達(dá)。H. TGCA數(shù)據(jù)庫也顯示PTENP1在內(nèi)膜樣癌中的低表達(dá)。I-J 通過qRT-PCR和Western blot檢測(cè),發(fā)現(xiàn)四個(gè)內(nèi)膜樣癌細(xì)胞株中PTEN/PTENP1和miR-200c也呈相反表達(dá)關(guān)系(**P <0.01)。 聲明:本文為該文獻(xiàn)通訊作者總結(jié),文獻(xiàn)編譯純屬學(xué)習(xí)交流,無任何商業(yè)目的。 作者介紹: 編輯 王昀 審核 劉愛軍
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