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動物行為實驗指南丨新奇性物體定位測試Protocol

 腦聲常談 2024-12-27 發(fā)布于上海

新奇性物體定位測試(NOLT)是一種常用的行為學(xué)實驗方法,用于評估嚙齒類動物的空間記憶和認知功能。該測試基于動物對環(huán)境中新奇變化的自然探索行為,特別是它們傾向于探索新位置的物體。NOLT可以用來評估小鼠的空間記憶能力,特別是在研究藥物、基因突變或環(huán)境因素對空間記憶的影響時。在阿爾茨海默病、帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的研究中,NOLT可以幫助評估這些疾病的動物模型中的認知功能障礙。通過比較給藥組和對照組的小鼠在NOLT中的表現(xiàn),可以評估潛在藥物對空間記憶的影響。
實驗箱通常是一個方形或圓形的封閉箱,尺寸約為40 cm × 40 cm × 30 cm。使用不同形狀、顏色和質(zhì)地的物體,但大小和高度應(yīng)保持一致,以避免視覺或觸覺上的偏差。

小鼠新物體識別實驗專用物體推薦


實驗步驟

適應(yīng)期:
將小鼠放入實驗箱中,讓其自由探索5-10分鐘,以適應(yīng)環(huán)境。適應(yīng)期結(jié)束后,將小鼠移出實驗箱并放回籠中。
訓(xùn)練期:
在實驗箱的兩個對角線上放置兩個相同的物體。將小鼠放入實驗箱中,允許其自由探索5-10分鐘。記錄小鼠在每個物體上的探索時間(通常是鼻子接觸物體的時間)。訓(xùn)練期結(jié)束后,將小鼠移出實驗箱并放回籠中。
測試期:
在訓(xùn)練期后的一段時間(通常為24小時),將其中一個物體的位置改變,使其成為新位置的物體。將小鼠再次放入實驗箱中,允許其自由探索5-10分鐘。    
記錄小鼠在原位置物體和新位置物體上的探索時間。
NOLT包括五個階段:預(yù)訓(xùn)練習(xí)慣化(第1-3天)、訓(xùn)練(第4天)和測試階段(第5天)。預(yù)訓(xùn)練習(xí)慣化包括每天10分鐘,每個受試者在沒有物體的情況下自由探索競技場。在10分鐘的訓(xùn)練階段,兩個相同的無氣味物體被放置在競技場后部,距離相鄰墻壁7厘米的位置。在10分鐘的測試階段,兩個物體中的一個保持在相同的熟悉位置(F),而另一個被移動到相鄰角落的新位置(N)。分析每個物體被嗅探的時間,定義為頭部朝向物體并在物體2厘米范圍內(nèi)的時間,通過手動分析。測試階段物體的位置以及新舊物體在小鼠之間進行了平衡。
數(shù)據(jù)記錄與分析:
探索時間:計算小鼠在原位置物體和新位置物體上的探索時間。
通常情況下,如果小鼠具有良好的空間記憶能力,它會花更多的時間探索新位置的物體。
DI = (新位置物體探索時間 / 總探索時間) * 100%
如果DI顯著高于50%,則表明小鼠能夠識別并記住物體的新位置,具有良好的空間記憶能力。DI = 100 × (嗅探N的時間 - 嗅探F的時間) / (嗅探N的時間 + 嗅探F的時間)。

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文獻引用:

1.Koutmani Y, Gampierakis IA, Polissidis A, Ximerakis M, Koutsoudaki PN, Polyzos A,et al. CRH Promotes the Neurogenic Activity of Neural Stem Cells in the Adult Hippocampus. Cell Rep. 2019;29:932–45.e7.
2.Tanabe, M., Kunisawa, K., Saito, I. et al. Adolescent social isolation decreases colonic goblet cells and impairs spatial cognition through the reduction of cystine. Mol Psychiatry (2024). https:///10.1038/s41380-024-02826-9   

《動物行為實驗指南》共674頁,涵蓋了常見的實驗動物,如小鼠、大鼠和斑馬魚,詳細描述了每一種行為測試的實驗設(shè)計、測試設(shè)備、實驗流程、評估指標(biāo)、預(yù)期結(jié)果、常見問題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應(yīng)用與局限性等各個方面。它通過快速引導(dǎo),幫助研究人員高效地掌握實驗的每個階段,減少了查閱文獻和尋找方法的時間,成為各類科研人員的重要參考資料。

《動物行為實驗指南》共計收錄了16種動物行為類型,包括焦慮抑郁、學(xué)習(xí)記憶、痛覺、運動、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動物模型等內(nèi)容。每一類動物行為下,都詳細介紹了多個經(jīng)典的實驗范式,涵蓋了超過100種實驗方法。

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