請注意，我并不是說正在擴(kuò)培的產(chǎn)品有問題；而是說擴(kuò)培過程可能存在問題。雖然我的公司也銷售可以擴(kuò)培這類的產(chǎn)品。

但我認(rèn)為，如果沒有適當(dāng)?shù)谋O(jiān)督，這些擴(kuò)培罐很可能會被弧菌污染，而且很可能是導(dǎo)致AHPNS的弧菌。這使得這種做法往往形成嚴(yán)重的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。有些產(chǎn)品可以避免這種情況，例如：我們廣泛使用的芽孢桿菌混合物，在使用前不需要活化或養(yǎng)成，這種更安全的方法正在被廣泛復(fù)制。

弧菌在水生環(huán)境中無處不在，在降解幾丁質(zhì)方面發(fā)揮著重要作用。幾丁質(zhì)是甲殼類和昆蟲等節(jié)肢動物外骨骼的主要成分，也存在于許多其他生物體中。超過135種弧菌（仍在增加）中的大多數(shù)都是良性的，盡管有些弧菌可以感染虛弱的動物。只有少數(shù)作為致病體與疾病相關(guān)，即它們感染并影響健康動物。全球最受關(guān)注的弧菌是引起AHPNS的弧菌。這是一種中毒，因?yàn)檫@些弧菌產(chǎn)生的PIRa和PIRb毒素的存在，是導(dǎo)致這種綜合征的原因。

編碼產(chǎn)生這些毒素的基因位于質(zhì)粒 (pVA1) 上，質(zhì)粒是一小段環(huán)狀DNA，不屬于細(xì)菌正常DNA的一部分。質(zhì)?？梢詳y帶許多不同的基因，其中包括：抗生素抗性基因、螯合鐵的外膜蛋白和各種毒素。這些特定的質(zhì)粒及其部分很容易在不同菌株和物種之間轉(zhuǎn)移，我們也才剛剛開始了解它們的廣泛性。

最初在中國報(bào)道了一種副溶血性弧菌（VP）菌株，在中國報(bào)道的培養(yǎng)物保藏庫中已鑒定出多種菌株。另外，在其他幾種弧菌中也發(fā)現(xiàn)了這種質(zhì)粒，包括一些通常被認(rèn)為是良性的弧菌和其他種類的細(xì)菌。人們可以預(yù)期，這種越來越多的細(xì)菌物種獲取質(zhì)粒并表達(dá)這些毒素的趨勢將繼續(xù)下去，特別是考慮到在對蝦養(yǎng)殖池塘才不同細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)培，但擴(kuò)培過程通常難以控制。

在許多相關(guān)發(fā)現(xiàn)中，不同菌株內(nèi)的質(zhì)粒數(shù)量不同。重要的是要了解，這些基因在細(xì)菌之間移動的過程并不高效，并且基因片段（僅編碼一種毒素及其許多變體的基因）確實(shí)會發(fā)生。有些菌株具有許多質(zhì)?？截悾赡懿粫a(chǎn)生太多毒素，而另一些菌株可能會產(chǎn)生高水平的毒素。有些可能產(chǎn)生兩種毒素，而另一些則可能只產(chǎn)生其中一種。這些毒素是造成病理學(xué)的原因，盡管最近的數(shù)據(jù)表明VP菌株的一些其他特性也參與其中。對無細(xì)胞、純化的毒素的研究表明，這些毒素可以引起靶器官中觀察到的損傷，并且細(xì)菌不需要存在。

細(xì)菌在蝦體內(nèi)和蝦體及其生活環(huán)境中無處不在。對于許多水產(chǎn)養(yǎng)殖者來說，弧菌被認(rèn)為是不良細(xì)菌，他們的注意力通常集中在那些不能降解蔗糖的物種上。在廣泛使用的弧菌選擇性培養(yǎng)基TCBS或TCBS瓊脂，一種選擇性瓊脂培養(yǎng)板，用于分離弧菌物種，該特性主要是當(dāng)菌落無法利用它時，它們會呈現(xiàn)綠色；當(dāng)它們可以利用它時，它們會呈現(xiàn)黃色。這是不正確的，因?yàn)楫a(chǎn)生疾病的能力和降解蔗糖的能力之間不存在相關(guān)性。

在不解決動物許多問題的真正原因的情況下，選擇性消除任何給定的細(xì)菌種類，包括：但不限于應(yīng)激源的存在以及病原體從親體轉(zhuǎn)移到蝦苗（PL），對于蝦來說，可能并不明智。微生物組很復(fù)雜，有選擇地消除其中的元素可以為其他細(xì)菌打開這些生態(tài)位。最近的觀察證實(shí)，消毒劑的廣泛使用似乎可以通過消除競爭性細(xì)菌來消除引起AHPNS的菌株。

大多數(shù)弧菌生長速度非常快，在適當(dāng)?shù)臈l件下，它們的繁殖下一代的時間可能為12分鐘或更短。當(dāng)有益的芽孢桿菌孢子產(chǎn)品在池塘邊擴(kuò)培時，孢子可能需要數(shù)小時才能萌發(fā)，甚至是許多物種和菌株需要12小時或更長時間，但某些物種和菌株的萌發(fā)速度比其他物種和菌株快。這取決于溫度和鹽度。此外，引起AHPNS的VP菌株具有一些特性，使它們能夠輕松生長并與許多其他細(xì)菌競爭。

PIRa和PIRb毒素可以在沒有細(xì)菌的情況下存在。細(xì)菌可以受到生物膜的保護(hù)，并被隔離在進(jìn)一步保護(hù)它們的區(qū)域。消毒劑的使用會破壞微生物群，實(shí)際上可能會為生長較快的細(xì)菌創(chuàng)造選擇優(yōu)勢，使其占據(jù)主導(dǎo)地位。越來越多的證據(jù)表明，即使是低水平的毒素也可能損害蝦的肝胰腺，這反過來又增加了動物健康的挑戰(zhàn)，影響生長率、飼料轉(zhuǎn)化率，當(dāng)然還有養(yǎng)蝦的盈利能力。

篩選產(chǎn)生毒素的特定細(xì)菌的存在是有問題的。這是因?yàn)槿藗儫o法確定哪些物種產(chǎn)生了毒素?？梢越?jīng)濟(jì)高效地采樣多少材料存在實(shí)際限制，即使使用最靈敏的技術(shù)仍然可能得到假陰性結(jié)果。由于各種原因，對復(fù)雜水生生態(tài)系統(tǒng)進(jìn)行采樣所存在的局限性導(dǎo)致總會出現(xiàn)一些漏報(bào)，如果樣本呈陰性就一定意味著所檢測的環(huán)境不含毒素，這種說法并不準(zhǔn)確。

池塘快速生長的細(xì)菌菌株/物種（例如弧菌），將以犧牲所有其他物種為代價進(jìn)行增殖。這就是為什么是抑菌抑菌至關(guān)重要的原因。多年來，養(yǎng)殖戶一直認(rèn)為向池塘添加有益細(xì)菌的最佳方法是在池塘邊擴(kuò)培細(xì)菌。他們相信，經(jīng)過擴(kuò)培細(xì)菌獲得高濃度細(xì)菌，能夠?qū)︷B(yǎng)蝦起到最大的幫助。

然而，在對環(huán)境開放的養(yǎng)殖系統(tǒng)中，許多因素都會影響池塘細(xì)菌的生長情況。但是，向池塘中添加大量細(xì)菌并不像看起來那么簡單，結(jié)果也不一定更好。池塘是一種復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)，需要向其中添加細(xì)菌，而添加的細(xì)菌受到營養(yǎng)物質(zhì)的可用性和現(xiàn)有微生物組對它們的競爭和限制。

有病毒細(xì)菌（稱為噬菌體）和多種以細(xì)菌為食的捕食者，這些細(xì)菌會因高水平的可用食物而繁殖，以及各種抗菌物質(zhì)，這些物質(zhì)共同作用限制了這些細(xì)菌的能力。為了外源細(xì)菌的生長，需要反復(fù)添加它們。但是沒有數(shù)據(jù)支持這樣的理論：在普通池塘中，添加量越多越好，因?yàn)橥ǔ艿侥承┮蛩氐南拗啤?/span>

然而，這只是該過程的一方面。含有產(chǎn)生毒素PirA和PirB的特定質(zhì)粒和基因的弧菌，在競爭很少時會蓬勃發(fā)展。標(biāo)準(zhǔn)是將糖蜜與海水混合，并培養(yǎng)含有孢子和許多其他非孢子形成細(xì)菌（目前作為有益細(xì)菌提供給行蝦農(nóng)）的產(chǎn)品，但不能確保將這種發(fā)酵物添加到池塘中時不存在Pir毒素。許多蝦農(nóng)可能無意中通過這種途徑將引起AHPNS的細(xì)菌添加到他們的池塘中。雖然證明這一點(diǎn)的數(shù)據(jù)沒有在同行的文獻(xiàn)中發(fā)表，但我個人的經(jīng)驗(yàn)，以及其他費(fèi)心觀察的人的經(jīng)驗(yàn)，在戶外擴(kuò)培細(xì)菌的經(jīng)驗(yàn)表明，弧菌是常見的污染物。

蝦農(nóng)面臨的風(fēng)險(xiǎn)不僅來自VP產(chǎn)生的毒素，而且這些池塘邊擴(kuò)培細(xì)菌的做法，以及管控不嚴(yán)，不僅會導(dǎo)致目標(biāo)有益細(xì)菌（通常是芽孢桿菌）的生長，還會導(dǎo)致其他許多細(xì)菌的生長，當(dāng)然包括不良弧菌和其他細(xì)菌的種類。這增加了編碼其他毒素和抗生素耐藥性的遺傳物質(zhì)交換的機(jī)會。某些VP菌株對蝦具有高致病性，可引起嚴(yán)重疾病，甚至在初次感染（通常通過傷口）后不到24小時內(nèi)死亡，而對現(xiàn)有抗生素的廣泛，且不斷增長的耐藥性可能構(gòu)成嚴(yán)重威脅。

對養(yǎng)殖缺乏監(jiān)管，AHPNS將繼續(xù)給各地蝦農(nóng)帶來嚴(yán)重挑戰(zhàn)，抗生素耐藥性將會蔓延。雖然這些毒素可能會產(chǎn)生一定的耐受性，甚至最終產(chǎn)生耐藥性，但目前正在發(fā)生的損害，并且肯定會持續(xù)到不久的將來，是巨大的，而且還在惡化。這種向池塘添加細(xì)菌的方法掩蓋了大多數(shù)蝦農(nóng)和供應(yīng)鏈要素，以及所涉及風(fēng)險(xiǎn)的總體缺乏了解。