畢業(yè)論文

多維元素片（21）中維生素C的含量測定

學(xué) 院

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論文作者（簽字）：      

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指導(dǎo)教師（簽字）：   

                                               年    月    日

摘 要

多維元素片（21）是一種現(xiàn)代保養(yǎng)藥劑，是補(bǔ)充人體多種維生素及微量元素的藥物，在現(xiàn)代中很多人都會進(jìn)行服用。在藥物構(gòu)成中，其中維生素C的含量比較重要，而藥物中是否能夠包含預(yù)期的維生素C也成為了探討的關(guān)鍵。本次研究中對三種多維元素片(21)進(jìn)行了測量，對藥物中的維生素C含量進(jìn)行了比對，也希望通過完整的分析過程與探討能夠促進(jìn)領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展。

關(guān)鍵詞：多維元素片(21)；維生素C；含量測定

Abstract

 Multidimensional Element Tablet (21) is a modern maintenance medicine that supplements multiple vitamins and trace elements in the human body, and many people will take it in modern times. In the composition of drugs, the content of vitamin C is relatively important, and whether the drug can contain the expected vitamin C has become the key to explore. In this study, three multidimensional element tablets (21) were measured and the vitamin C content in the drug was compared. It is also hoped that the complete analysis process and discussion can promote the progress and development of the field.

Key words: multidimensional element sheet (21); Vitamin C; Assay

目 錄

第1章 引言

第2章 實(shí)驗(yàn)對象和實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)對象

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.3試劑和儀器

2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器

2.3.2 實(shí)驗(yàn)藥品

第3章 實(shí)驗(yàn)步驟

3.1 樣品的處理

3.2 定量分析

第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 顯色反應(yīng)

4.2 進(jìn)行85％硫酸處理

4.3 樣品比色測定

4.4 計(jì)算結(jié)果

第5章 討論

結(jié) 論

參考文獻(xiàn)

致 謝

第1章 引言

維生素C(Vitamin C，Ascorbic Acid) 又叫L-抗壞血酸，是一種水溶性維生素。食物中的維生素C被人體小腸上段吸收。一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中，正常成人體內(nèi)的維生素C代謝活性池中約有1500mg維生素C,最高儲存峰值為3000mg 維生素C。正常情況下，維生素C絕大部分在體內(nèi)經(jīng)代謝分解成草酸或與硫酸結(jié)合生成抗壞血酸-2-硫酸由尿排出;另一部分可直接由尿排出體外。隨著生活水平的提高，人們對健康有了新的認(rèn)識，健康不僅僅是不生病，還應(yīng)該是在體內(nèi)各微量元素和維生素達(dá)到均衡的前提下，沒有疾病、心態(tài)良好、情緒穩(wěn)定的一種狀態(tài)。維生素也叫維他命，意思維持人體生命不可缺少的東西，所以它是人體必須的重要營養(yǎng)素之一。維生素C就是其中之一，它能促進(jìn)各種組織及細(xì)胞間黏合物的形成；還能促進(jìn)體內(nèi)氧化作用，其發(fā)生的氧化還原反應(yīng)在人體內(nèi)起傳遞氫的作用；它還可以促進(jìn)鐵的吸收，提高機(jī)體的應(yīng)激能力。它的攝入方式有多種，主要有從食物中攝取，口服含有維生素的補(bǔ)品，藥劑。多維元素片（21）就屬于藥劑的一類，多維元素片(21)是含有多種維生素、礦物質(zhì)及微量元素的營養(yǎng)補(bǔ)充制劑，能夠補(bǔ)充身體所需的營養(yǎng)素，在確定膳食不足或缺乏的情況下，用于預(yù)防和治療營養(yǎng)缺乏癥。多維元素片(21)適合經(jīng)常熬夜、運(yùn)動、減肥、偏食以及老年人等人群。對于經(jīng)常熬夜會破壞身體免疫系統(tǒng)，服用多維元素片(21)可以幫助改善身體狀態(tài)，減輕疲勞感。經(jīng)常運(yùn)動會導(dǎo)致體內(nèi)礦物質(zhì)和微量元素流失，服用多維元素片(21)可以補(bǔ)充礦物質(zhì)和微量元素。正在減肥或偏食的人群容易缺乏鐵元素和鋅元素，可能導(dǎo)致缺鐵性貧血或厭食癥的發(fā)生，可服多維元素片(21)改善。老年人體內(nèi)鈣元素流失嚴(yán)重，容易引起骨質(zhì)疏松，服多維元素片(21)可以補(bǔ)充鈣元素及身體所需的其他微量元素。

第2章 實(shí)驗(yàn)對象和實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)對象

本次針對多元維素片（21）進(jìn)行檢測，主要檢測藥品中維生素c的含量。在具體選擇中，共計(jì)選擇了三種品牌多元維素片（21）進(jìn)行檢測，分別命名為A類多元維素片（21）、B類多元維素片（21）和C類多元維素片（21）。以三者維生素C含量為檢查對象進(jìn)行檢查。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

維生素c又稱抗壞血酸(ascorbic acid) 。在1928年， 從牛的腎上腺皮質(zhì)中提取出的結(jié)晶物質(zhì),證明對治療和預(yù)防壞血病有特殊功效，因此稱為抗壞血酸。紫外-可見分光光度法，利用紫外可見分光光度計(jì)檢測維生素C,即在紫外光區(qū)200~400nm范圍內(nèi)，酸性條件下維生素C在紫外光譜245 nm6左右有最大吸收峰，通過建立維生素C含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品中所含維生素C進(jìn)行定量測定。該方法的操作簡單快速、檢測限低，不必再進(jìn)行基準(zhǔn)試劑的標(biāo)定，且試劑易得，適用于維生素C的快速檢測，但維生素C易受溫度、光照等的影響，儀器價(jià)格也較昂貴。

2.3試劑和儀器

2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器

如表4-1所示：

表4-1 實(shí)驗(yàn)儀器

2.3.2 實(shí)驗(yàn)藥品

如表4-2所示。

表4-2 實(shí)驗(yàn)藥品 

此外需要進(jìn)行材料制備，具體：（1）4.5mol.L^-1硫酸。量取250mL濃硫酸小心加入700mL水中，冷卻后用水稀釋至1000mL。（2）85％硫酸。小心加900mL濃硫酸于100mL水中。（3）2％的2,4-二硝基苯肼溶解。取2g 2,4-二硝基苯肼溶于100mL的4.5mol.L^-1硫酸中，過濾。保存于冰箱內(nèi)，每次使用前必須過濾。（4）2％草酸溶液 。

還需制備硫脲溶液。根據(jù)具體的比例制作1%和2%的硫脲溶液，分別將對應(yīng)劑量的硫脲融入到草酸溶液中，稀釋鹽酸，并且稱取100mg的抗壞血酸融入到草酸溶液中。并且加入100mg活性炭，進(jìn)行回流制備，后續(xù)進(jìn)行過濾，放到烘箱中進(jìn)行烘干。

第3章 實(shí)驗(yàn)步驟

3.1 樣品的處理

將 A類多元維素片（21）、B類多元維素片（21）和C類多元維素片（21）分別取出100g，然后放入草酸溶液，制備完成后進(jìn)行混勻，過濾后進(jìn)行備用。                                                                          

3.2 定量分析

（1）吸取5mL，10mL，20mL，25mL，40mL，50mL，60mL，70mL稀釋液，分別放入8個100mL容量瓶中，用1％硫脲溶液稀釋至刻度，使最后稀釋液中抗壞血酸的深度分別為1μg／mL，2μg／mL，4μg／mL，5μg／mL，8μg／mL，10μg／mL，12μg／mL，14μg／mL，為抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)使用液。

（2）分別吸取4mL各不同深度的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)使用液，于8個試管中，吸取4mL水于試劑空白管，各加入1.0mL2％ 2,4-二硝基苯肼溶液，混勻，將全部試管放入37℃±0.5℃恒溫箱或恒溫水浴中保溫三小時(shí)。

（3）加2g活性炭于50mg標(biāo)準(zhǔn)溶液中，振動1min后過濾。吸取10.00mL濾液放入500mL容量瓶中加5.0g硫脲，用1％草酸溶液稀釋至刻度?？箟难釢舛葹?0μg／mL。

（4）3h后將9個試管取出，全部放入冰水冷卻后，向每一試管中加入5mL85％硫酸，滴加時(shí)間至少1min，邊加邊搖。將試管自冰水取出，在室溫放置30min后以試劑空白管調(diào)零，并比色測定。測定不同濃度的抗壞血酸的濃度之前我們拿50mL濃度為10μg/mL的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液來測定波長，測定結(jié)果的波長掃描如圖5-1所示：

表5-1 吸光度和波長的關(guān)系

從上表5-1可以看出測定抗壞血酸最大吸光度相應(yīng)的波長為520nm，在520nm波長處測定不同深度的標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度。

表5-2 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光濃度

根據(jù)上表5-2所示抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的含量和吸光度值，以抗壞血酸含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。如圖5-2所示：

圖5-2 曲線圖

Y = A + B * X      A＝0.00144  ，  B＝0.02754

Y =0.00144﹢0.02754 X

ｒ＝0.99988

第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

對樣品進(jìn)行樣品還原型抗壞血酸的氧化處理量取25.00mL 上述樣品濾液，加入2g活性炭，振搖1 min，過濾（棄去最初數(shù)mL濾液）。吸取10.00mL濾液，加入 10.00mL 2% 硫脲溶液并混勻，此為樣品稀釋液。

4.1 顯色反應(yīng)

（1）取兩支試管，各加入2mL經(jīng)氧化處理的樣品稀釋液。其中一支試管作為空白，向其余一支試管加入1.00mL2％ 2,4-二硝基苯肼溶液，將所有試管放入37℃±0.5℃恒溫箱或恒溫水浴中，保溫三小時(shí)。

（2）三小時(shí)后取出，除空白管外，將另一個試管放入冰水中，空白管取出后使其冷到室溫，然后加入2％ 2,4-二硝基苯肼溶液1.00mL，在室溫中放置10 min～15 min，后放入冰水內(nèi)。

4.2 進(jìn)行85％硫酸處理

當(dāng)試管放入冰水冷卻后，向每一試管中加入85％硫酸5mL，滴加時(shí)間至少需要1min，需邊加邊搖動試管。將試管自冰水中取出，在室溫放置30 min后比色。

4.3 樣品比色測定

    用一厘米比色皿，空白液調(diào)零點(diǎn)，與520nm波長測定吸光值。如表6-1所示：

表6-1 樣品吸光度值

4.4 計(jì)算結(jié)果

品中總抗壞血酸含量由式（6-1）求得，計(jì)算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位。

X＝C/m×100%                                         式（6-1）

式中 X——每百克樣品中總抗壞血酸含量，單位為mg

C——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得或由回歸方程算得試樣測定夜總抗壞血酸含量，單位為mg

M——測定時(shí)所取濾液相當(dāng)于樣品的用量，單位為g。

表6-2 三種多維元素片（21）維生素C的含量（mg/100g）

從上表6-2最后匯總的結(jié)果可以看出，三種多維元素片（21）中的維生素C含量與預(yù)期大體一致，雖然說相比于25mg的標(biāo)準(zhǔn)值存在差異，但是由于實(shí)驗(yàn)中可能存在損耗等誤差，因此結(jié)果大體是符合預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)的。

第5章 討論

5.1維生素c的主要功能

1、膠原蛋白的合成:膠原蛋白的合成需要維生素C參加，所以VC缺乏，膠原蛋白不能正常合成，導(dǎo)致細(xì)胞連接障礙。人體由細(xì)胞組成，細(xì)胞靠細(xì)胞間質(zhì)把它們聯(lián)系起來，細(xì)胞間質(zhì)的關(guān)鍵成分是膠原蛋白。膠原蛋白占身體蛋白質(zhì)的1/3， 生成結(jié)締組織，構(gòu)成身體骨架。如骨骼、血管、韌帶等，決定了皮膚的彈性，保護(hù)大腦，并且有助于人體創(chuàng)傷的愈合。

2、治療壞血病:血管壁的強(qiáng)度和VC有很大關(guān)系。微血管是所有血管中最細(xì)小的，管壁可能只有一個細(xì)胞的厚度，其強(qiáng)度、彈性是由負(fù)責(zé)連接細(xì)胞具有膠泥作用的膠原蛋白所決定。當(dāng)體內(nèi)VC 不足，微血管容易破裂，血液流到鄰近組織。這種情況在皮膚表面發(fā)生，則產(chǎn)生淤血、紫癍;在體內(nèi)發(fā)生則引起疼痛和關(guān)節(jié)漲痛。嚴(yán)重情況在胃、腸道、鼻、腎臟及骨膜下面均可有出血現(xiàn)象，乃至死亡。

3、預(yù)防牙齦萎縮、出血:健康的牙床緊緊包住每一顆牙齒。牙齦是軟組織，當(dāng)缺乏蛋白質(zhì)、鈣、VC時(shí)易產(chǎn)生牙齦萎縮、出血。維生素C略帶酸性，作為微量營養(yǎng)素被攝入體內(nèi)，經(jīng)體內(nèi)溶解、消化，其酸堿性對人體的影響是微乎其微的，因此不用考慮。維生素C有助鞏固細(xì)胞組織,有助于膠原蛋白的合成，能強(qiáng)健骨骼及牙齒,還可預(yù)防牙齦出血，長期服用對牙齒、牙齦無害而且有益。

通常多維元素片(21)是補(bǔ)充維生素和微量元素的藥物，每片中主要含有維生素A5000IU，葉酸400μg，鋅15mg和維生素D400IU等，除此之外還含有少量的維生素和其它微量元素。對于慢性腎衰竭、慢性肝功能不全而引起的營養(yǎng)和吸收障礙，或者因?yàn)殚L期腹痛、腹瀉、消化道的吸收功能不全，而引起的慢性維生素和微量元素不能吸收，引發(fā)多種維生素和微量元素的缺乏，具有很好的補(bǔ)充作用和補(bǔ)充效果。但是多維元素片(21)不建議兒童服用，常規(guī)在成人服用基礎(chǔ)之上，老年人服用時(shí)應(yīng)該適當(dāng)?shù)臏p量和減半。

5.2維生素c的測量方法

從維生素C的研究方法入手來看，目前的主流方法分為以下幾種：

第一種，滴定法。滴定法又可以分為碘量法和2,6-二氯靛酚滴定法。碘量法用于維生素C的檢測中，其檢測原理基于碘單質(zhì)對維生素C的氧化能力。以淀粉作為指示終點(diǎn)的指示劑，用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液對含維生素C的樣液進(jìn)行滴定，待氧化還原反應(yīng)完成時(shí)，多余的碘單質(zhì)與指示劑將反應(yīng)生成藍(lán)色的絡(luò)合物，指示滴定終點(diǎn)。由滴定過程中滴定液的消耗體積換算數(shù)量關(guān)系得到樣品中維生素C的含量。直接碘量法測量成本較低、變色敏銳、結(jié)果可靠，但碘溶液本身的腐蝕性和不穩(wěn)定性導(dǎo)致其標(biāo)準(zhǔn)溶液配制和標(biāo)定過程煩瑣，耗時(shí)較長間^[9]。而關(guān)于2,6-二氯靛酚滴定法也可稱作二氯酚靛酚，堿性條件下或其氧化態(tài)表現(xiàn)為深藍(lán)或藍(lán)色，反之則呈粉紅或紅色。2,6-二氯靛酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液是一種堿性藍(lán)色染料，用于滴定含還原型維生素C的酸性樣液，維生素C發(fā)生氧化反應(yīng)轉(zhuǎn)變成脫氫抗壞血酸，2,6- 二氯靛酚染料則發(fā)生還原反應(yīng)呈現(xiàn)無色。滴定終點(diǎn)處稍過量的染料使酸性樣液呈現(xiàn)微紅色。根據(jù)染料的消耗體積計(jì)算樣品中維生素C的含量。此方法檢測維生素C含量雖方便快捷，可以一次測定大量樣品，但只能測定還原型抗壞血酸，且易受其他還原性物質(zhì)和有色物質(zhì)甲的干擾^[10]。

第二種則是熒光法。熒光法或熒光分析法，以活性炭.作為氧化劑，與樣品中沒有熒光的維生素C起氧化還原作用，生成脫氫抗壞血酸，脫氫抗壞血酸再與熒光底物鄰苯二胺反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，其熒光強(qiáng)度與維生素C的濃度在某種條件下表現(xiàn)出正相關(guān)。在檢測試樣中的維生素C含量時(shí)，由于硼酸與脫氫抗壞血酸形成的絡(luò)合物不與鄰苯二胺發(fā)生反應(yīng)，空白試驗(yàn)組可加入硼酸作脫氫抗壞血酸的掩蔽劑，以此檢測試樣中各種雜質(zhì)的總熒光值，排除其光譜干擾問。熒光法測定維生素C的靈敏度高、線性關(guān)系好，可實(shí)現(xiàn)對維生素C和脫氫抗壞血酸的定量分析，但鄰苯二胺本身具有一定的光譜干擾性，且活性炭可吸附維生素C^[11]。

第三種紫外-可見分光光度法，利用紫外可見分光光度計(jì)檢測維生素C,即在紫外光區(qū)200~400nm范圍內(nèi)，酸性條件下維生素C在紫外光譜245 nm6左右有最大吸收峰，通過建立維生素C含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品中所含維生素C進(jìn)行定量測定。該方法的操作簡單快速、檢測限低，不必再進(jìn)行基準(zhǔn)試劑的標(biāo)定，且試劑易得，適用于維生素C的快速檢測"，但維生素C易受溫度、光照等的影響，儀器價(jià)格也較昂貴^[12]。

此外還包括如高效液相色譜法、鉬藍(lán)比色法等。例如高效液相色譜法是國家標(biāo)準(zhǔn)中食 品中抗壞血酸含量的檢測方法之一， 它以磷酸二氫鉀、十六烷基三甲基溴 化銨、磷酸、甲醇的混合試劑為流動相，用偏磷酸溶液溶解樣品中的維生素 C，再經(jīng)過進(jìn)一步的超聲提取、反向色譜柱分離后用液相色譜儀于 245 nm 波長處測定。檢測并排除樣品中脫氫抗壞血酸的含量，需先使用 L半胱氨酸溶液還原脫氫抗壞血酸，再利用紫外檢測器于相同波長處測定其含量，或減去已測得的維生素C含量。使用 HPLC檢測食品中維生素C含量，具有分離效率高、檢測靈敏、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于食品、藥品中維生素C含量的檢測研究，但 HPLC 檢測成本高、耗時(shí)長，且偏磷酸帶有劇毒^[13]。

綜合上述方法的對比，最后在本次研究中選用了分光光度法進(jìn)行本次實(shí)驗(yàn)。

結(jié) 論 

通過對多維元素片(21)維生素c含量的測定，重新進(jìn)行了相關(guān)步驟的思考，并且進(jìn)行了完整的實(shí)驗(yàn)過程。相比于其他測試方法，本次研究中運(yùn)用了分光光度法對三種多維元素片(21)的維生素C含量進(jìn)行了測定，最后結(jié)果都符合預(yù)期結(jié)果，也說明此類藥品的基本功能型都有所保障，也符合預(yù)期要求。

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