實(shí)驗(yàn)室SOP文件

規(guī)范新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理程序，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和及時(shí)性。

新冠病毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室。

從事新冠病毒核酸檢測的技術(shù)人員。

1. 參考依據(jù)：

醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（ 試行 第二版）、《新型冠狀病毒核酸快速檢測臨床規(guī)范化應(yīng)用專家共識》、《實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)》、《新型冠狀病毒感染臨床檢測技術(shù)》

2. 原則：

為保證最終報(bào)告給臨床醫(yī)師和患者的新冠病毒核酸檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和及時(shí)性，從事新冠病毒核酸檢測的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取一系列有計(jì)劃的質(zhì)量控制措施，這既是我們通常所說的質(zhì)量保證。實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量保證應(yīng)覆蓋整個(gè)新冠病毒病毒核酸檢測流程，包括分析前、分析中和分析后各個(gè)環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)室需要充分了解本實(shí)驗(yàn)室整個(gè)流程，并且在合適的關(guān)鍵點(diǎn)應(yīng)用恰當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制程序。室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評均是質(zhì)量保證的重要組成部分。

3. 內(nèi)容：

3.1 核酸檢測前的質(zhì)量管理：

新冠病毒核酸檢測前的質(zhì)量管理針對的是分析前質(zhì)控環(huán)節(jié)，主要涉及人員培訓(xùn)、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施、儀器設(shè)備及管理、試劑的性能驗(yàn)證和質(zhì)檢、標(biāo)本的采集運(yùn)送和保存的質(zhì)量控制，以及標(biāo)準(zhǔn)操作程序的編寫等。

（1）人：指人員培訓(xùn)及能力評估，為避免由人員能力差異而導(dǎo)致檢測結(jié)果異常的問題，從事病毒核酸檢測的人員應(yīng)按照培訓(xùn)計(jì)劃接受培訓(xùn)，培訓(xùn)應(yīng)包括外部培訓(xùn)和內(nèi)部培訓(xùn)。

（2）機(jī)：指儀器設(shè)備的正確操作、日常維護(hù)和定期校準(zhǔn)。

（3）料：指合格的臨床標(biāo)本、使用試劑的性能驗(yàn)證和耗材的質(zhì)檢。（合格的臨床標(biāo)本是嚴(yán)格遵守指南進(jìn)行的標(biāo)本采集、運(yùn)送和保存要求的標(biāo)本，從而可以保核酸檢測結(jié)果的可靠性，避免假陰性。檢測試劑要求是NMPA批準(zhǔn)的，并且使用前進(jìn)行性能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)符合要求的，另外，在使用中，還應(yīng)該對每一批試劑盒進(jìn)行質(zhì)檢（即批檢）。實(shí)驗(yàn)室使用的配套耗材，每批次都應(yīng)進(jìn)行質(zhì)檢，合格后方能使用。性能驗(yàn)證和質(zhì)檢都應(yīng)該有相應(yīng)的SOP文件，并且每次檢測后要有原始記錄并歸檔保存。）

（4）法：主要指實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可操作的SOP文件，并要求實(shí)驗(yàn)室全員遵守。（實(shí)驗(yàn)室應(yīng)針對每個(gè)環(huán)節(jié)均建立相應(yīng)具有可操作性的SOP，SOP文件一旦確認(rèn)，不可輕易更改。另外，整個(gè)檢測流程中所涉及的記錄也是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。）

（5）環(huán)：指實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、實(shí)驗(yàn)室分區(qū)、溫度、濕度和通風(fēng)。加強(qiáng)環(huán)境因素的管理是為了避免其對檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性造成影響及造成實(shí)驗(yàn)室污染。

3.2  核酸檢測中的質(zhì)量管理：

（1）核酸檢測分析中的步驟主要包括試劑準(zhǔn)備、樣本處理（核酸提?。⒑怂釘U(kuò)增、核酸檢測和結(jié)果分析等，其中核酸提取質(zhì)量和擴(kuò)增檢測過程會直接影響檢測結(jié)果，需進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

（2）室內(nèi)質(zhì)控設(shè)置：

① 常規(guī)PCR檢測：

依據(jù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（ 試行 第二版）要求

- 質(zhì)控品應(yīng)與所有標(biāo)本同時(shí)檢測。

-每批檢測至少有1份弱陽性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的1.5-3倍）、3份陰性質(zhì)控品（生理鹽水）。

-質(zhì)控品隨機(jī)放在臨床標(biāo)本中，參與從提取到擴(kuò)增的全過程。

②核酸快速檢測：

依據(jù)《新型冠狀病毒核酸快速檢測臨床規(guī)范化應(yīng)用專家共識》

-室內(nèi)質(zhì)控品包括陰性質(zhì)控品（生理鹽水）和弱陽性質(zhì)控品（濃度為檢測限的1.5-3倍）。

-每次開機(jī)先檢測弱陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品，質(zhì)控合格后，開始進(jìn)行臨床標(biāo)本檢測，開機(jī)檢測達(dá)到24小時(shí)，或者未達(dá)到24小時(shí)但連續(xù)檢測標(biāo)本數(shù)量達(dá)到50個(gè)，均應(yīng)再次檢測弱陽性質(zhì)控品，以監(jiān)測是否在控。

-開機(jī)陰性質(zhì)控品后，可不再做陰性質(zhì)控品。但一旦出現(xiàn)陽性樣本，即為失控。開機(jī)檢測陰性質(zhì)控品（生理鹽水），應(yīng)關(guān)注是否存在內(nèi)對照的污染。

（3）弱陽性質(zhì)控品的統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控方法

-同時(shí)分析弱陽性質(zhì)控品檢測的不同基因（2或3個(gè)基因）。

-通過檢測的Ct值進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

-將Ct值結(jié)果繪制在Levey-Jennings質(zhì)控圖上，通過觀察檢測值是否在可接受范圍內(nèi)、是否有突然上升或下降等監(jiān)測檢測系統(tǒng)的性能。

對于新冠病毒核酸檢測項(xiàng)目來說，目前其預(yù)期用途為臨床診斷或鑒別診斷，為定性檢測，缺乏總允許誤差的規(guī)定，也缺乏檢測標(biāo)準(zhǔn)化，但已知濃度的質(zhì)控品Ct值的變化可反映在不同批次測定中得到的核酸檢測結(jié)果之間的一致性，因此，采取的質(zhì)控措施應(yīng)保證檢測結(jié)果的質(zhì)量符合臨床預(yù)期用途，可通過將Ct值結(jié)果繪制在Levey-Jennings質(zhì)控圖上，通過觀察檢測值是否在可接受范圍內(nèi)、是否有突然上升或下降等監(jiān)測檢測系統(tǒng)的性能。

3.3 核酸檢測后的質(zhì)量管理

新冠病毒核酸檢測報(bào)告的規(guī)范化，依據(jù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（ 試行 第二版）要求

-采集時(shí)間、接收時(shí)間、檢測時(shí)間等要精確到分鐘

-注明檢測方法學(xué)和檢測下限

-備注結(jié)果解釋