影響因子：13.751

請掃描下方二維碼

研究背景：肌肉浸潤性膀胱癌(MIBC)的5年生存率低于50%，且治療效果不理想。免疫檢查點抑制劑(ICI)和靶向治療可為MIBC的治療提供新思路。腫瘤相關巨噬細胞(TAMs)在TME中可表現出多效性功能。IL-10作為一種免疫抑制細胞因子，它的分泌可能是一種功能性TAMs的特征。然而，免疫抑制IL-10⁺TAMs在MIBC中的臨床結果和治療方面的意義尚不清楚。

研究結果：

一、IL-10⁺TAMs浸潤對MIBC患者不良臨床預后的預后價值

二、IL-10⁺TAMs浸潤對MIBC患者ACT反應的預測價值

1、在TCGA和ZS隊列中，MIBC患者均未能從基于順鉑的輔助化療中獲益(圖2A，B)。

2、在兩組隊列中，IL-10⁺ TAMs浸潤高的ACT患者的生存獲益。在TCGA隊列中，低IL-10⁺TAMs浸潤的患者在接受ACT治療后，RFS較低(圖2A，下)。

三、識別IL-10⁺TAMs浸潤的免疫侵入微環(huán)境

1、根據TCGA隊列的RNA-seq結果，選擇差異表達基因(DEGs)，進行GO分析，結果顯示多重免疫抑制基因集在IL-10⁺TAMs高亞組中富集，包括對T細胞增殖和免疫應答的負調控(圖3A)。

2、在TCGA隊列中的DEGs中，IL-10⁺TAMs高亞組中免疫檢查點基因表達上調(圖3B)。

3、IL-10⁺TAMs高亞組的患者表現出豐富的免疫浸潤狀態(tài)，如圖3C所示，高IL-10+TAMs特征與較高水平的免疫抑制細胞和較低水平的活性樹突狀細胞相關。免疫組化結果一致（圖3D）。

4、利用TCGARNA-Seq數據，通過GSEA進一步描述了耗竭的CD8+T細胞和未成熟的NK細胞在IL-10⁺TAMs高亞組中高度富集(圖3E)。

5、CD8+T細胞的功能標記物與IL-10+TAMs浸潤呈負相關；CD8+T細胞的耗竭標記物與IL-10+TAMs浸潤呈正相關；FCM結果證實了IL-10+TAMs水平與免疫檢查點表達呈正相關（圖3F）。

四、通過scRNA-seq對MIBC的IL-10⁺TAMs特征進行分析

1、單細胞測序來自6個MIBC樣本和2個瘤周樣本(圖4A)；分析顯示有11種細胞類型的26個細胞簇(圖4B)，IL-10主要在所有細胞類型的巨噬細胞上表達(圖4C）。

2、IL-10⁺TAMs中M1巨噬細胞標志物表達顯著下調，而M2巨噬細胞標志物表達上調(圖4D)。

3、聚類分析顯示SOX7、MYC等核心轉錄因子也在IL-10⁺TAMs中富集(圖4E)。

4、IL-10⁺TAMs和耗竭CD8+T細胞之間存在相互作用(圖4F)。

5、NKG2D II受體-MICA在IL-10+TAMs中顯著富集，暗示IL-10+TAMs可能在重塑CD8+T細胞功能狀態(tài)中發(fā)揮作用(圖4G)。

五、IL-10⁺TAMs浸潤的分子特征和治療意義

1、圖5A：IL-10⁺TAMs與MIBC不同分子亞型的分布有關。IL-10+TAMs高亞組和低亞組中涉及MIBC的關鍵基因的突變率存在顯著差。

2、Cox分析顯示，在患者中IL-10⁺TAMs高水平與TP53等重要基因的修復功能相關；KMT2D突變可能介導IL-10⁺TAMs積累及其下游機制(圖5B)。

3、在IL-10⁺TAMs高亞組中觀察到較高的EGF 信號傳遞、抗原呈現和免疫檢查點分數，提示IL-10+較高的患者 的患者對EGFR靶向治療和免疫治療更敏感。

總結：本研究納入了臨床患者及數據庫患者信息，采用免疫組化、單細胞RNA測序和流式細胞術等檢測IL-10⁺TAMs的功能狀態(tài)及其與其他免疫細胞的相關性。結果發(fā)現，高IL-10+TAMs浸潤與總生存期和無復發(fā)生存期預后較差相關，具有抑制特征的IL-10⁺TAMs與免疫逃避性腫瘤微環(huán)境相關，此外，高IL-10⁺TAMs浸潤與基底特征亞型和增強EGF信號相關。提示IL-10⁺TAMs可能為EGFR靶向治療以及免疫治療提供指導，免疫抑制IL-10+TAMs作為治療靶點的潛力值得進一步探索。