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商業(yè)無菌鏡檢 請教野獸老師

 荷塘柳葉 2021-09-04
很久不上帖子,今天上來,回個帖子幫助一下新人。嘿嘿。首先是染色問題,染色是用能著色的染料(有些附著在細胞壁,有些附著在細胞膜上,還有些其他)讓細菌身體帶有顏色,然后通過顯微鏡后讓我們?nèi)菀卓吹郊毦臉幼樱ㄈ绻蝗旧毦蠖鄷驗橥该鞫床磺宄蚩床坏剑?,一般染色后細菌因為?jīng)過染料,過火固定等步驟已經(jīng)不幸都死掉了,所以我們大多看到的染色后的菌都是死掉的,如果想看活的需要用好一點的顯微鏡(具體是暗視野還是其他什么的忘記了 自己去咨詢一下顯微鏡公司或百度一下不難找到的),如果要區(qū)分樣品中的菌的死活有2種染色辦法,當然染完之后你看到的載玻片上的菌還是死的。下面介紹2種區(qū)分死菌活菌的染色辦法,前提你要有熒光顯微鏡 不然染色完了也沒法看。

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吖啶橙染色,(前面有同學(xué)提到),細菌在吖啶橙染色后 藍光激發(fā)下呈現(xiàn)紅色(活菌)或綠色(休眠或死菌),具體染色辦法可以百度或查找文獻,值得注意的是染色要避光,一般在冰箱用進行。

還有一種區(qū)分自養(yǎng)菌異養(yǎng)菌的染色辦法,DAPI染色(4'6-二脒基-2-苯基吲哚),染色后異氧菌紫外光下呈藍色,自養(yǎng)型菌呈現(xiàn)紅色。

再次就是說一下顯微鏡的倍數(shù)問題,一般目鏡用10倍的,物鏡分為4,10,20,40,100倍鏡頭,其中高低的區(qū)分是根據(jù)倍率高低而定的,所謂低倍就是4,10,20這種倍數(shù)比較低的,高倍就是40,100這種高倍的而已,如果要計數(shù)你需要了解鏡頭的倍數(shù)(物鏡和目鏡相乘),然后選取合適的鏡頭以便看的清楚明白的大小合適為宜。

最后說一下視野,所謂視野就是你在當前目鏡和物鏡組成的鏡頭下看到的圓圈圈那個框下的所有能看到的位置,所以計算一個視野內(nèi)細菌數(shù)就是你看到一個圈圈內(nèi)的細菌總數(shù),然后你再換一個視野,就是另一個圈圈內(nèi)菌數(shù)咯,如果要計算5個視野內(nèi),就是找5個比較均勻一致的視野來觀察就行。

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