    （續(xù)上期） 上期主題： 《個(gè)性化疫苗，鎖定目標(biāo)巧布兵！》（上期鏈接點(diǎn)擊這里） 本期主題： 本期系長篇連載《腫瘤免疫治療的故事》的第三回的第二章的第一節(jié)——《淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞療法》。 第三回：腫瘤免疫治療的四支部隊(duì) 第二章：細(xì)胞免疫部隊(duì)多兵種作戰(zhàn) 第一節(jié)：淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞 本期關(guān)鍵詞： 癌癥，腫瘤免疫治療，白細(xì)胞介素2，過繼性細(xì)胞免疫療法，淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞，LAK療法。     源于20世紀(jì)80年代細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、生物工程學(xué)等諸多理論研究的深入，使得腫瘤免疫治療有了更明確的目的性、靶向性和有效性。 機(jī)體內(nèi)有多種具有殺傷作用的淋巴細(xì)胞，諸如自然殺傷細(xì)胞、殺傷細(xì)胞、殺傷性T細(xì)胞等，它們本身就能夠?qū)拱┘?xì)胞的產(chǎn)生。根據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察，一個(gè)癌細(xì)胞需要上百個(gè)淋巴細(xì)胞對付它。而一立方厘米大小的瘤塊中約有10億個(gè)癌細(xì)胞。因此，如果有大量的淋巴細(xì)胞，就能夠有效的消滅癌細(xì)胞，因此產(chǎn)生了“細(xì)胞免疫療法”的基本理念。   T細(xì)胞在向癌細(xì)胞發(fā)起進(jìn)攻 “細(xì)胞免疫療法”的全稱叫“過繼性細(xì)胞免疫療法”（Adoptive Cellular Immunotherapy，簡稱ACI或AIT），是指通過對從腫瘤患者自體內(nèi)提取出來的免疫細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)、激活和擴(kuò)增，然后將其重新輸回腫瘤患者體內(nèi)，并輔以合適的生長因子，促使其發(fā)揮殺傷癌細(xì)胞的功能。  過繼性細(xì)胞免疫治療經(jīng)歷了五代的發(fā)展，從最早的淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK，第一代），到第二代細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷性細(xì)胞（CIK），至第三代腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TIL），進(jìn)而是第四代抗原特異性的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL），已經(jīng)發(fā)展到第五代嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）。 下面分別介紹： 第一節(jié)：淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞療法（第一代“細(xì)胞免疫療法”）（一）什么是淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞療法？淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（Lymphokine Activated Killer，LAK）療法，是將從外周血提取出的淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)，經(jīng)淋巴因子白細(xì)胞介素2（Interleukin-2，簡稱白細(xì)胞介素2）激活后擴(kuò)增，回輸至患者體內(nèi)，從而廣譜地殺傷癌細(xì)胞的治療方法。 美國國立癌癥研究院史蒂文·羅森博格（Steven Rosenberg） 這一細(xì)胞免疫治療方法的原理，最早由美國國立癌癥研究院史蒂文·羅森博格（Steven Rosenberg）于1984年提出。 他認(rèn)為，由于腫瘤患者體內(nèi)存在著腫瘤微環(huán)境，免疫應(yīng)答效應(yīng)細(xì)胞因?yàn)槭艿侥[瘤微環(huán)境中的細(xì)胞因子等作用，不能完全活化而殺滅癌細(xì)胞。而白細(xì)胞介素2作為免疫淋巴細(xì)胞因子，可以激發(fā)免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞），增強(qiáng)它們清除癌細(xì)胞的活性。于是，他做了兩件事：第一是通過外周血將患者的單個(gè)淋巴細(xì)胞提取出來，將其與一定量的淋巴因子白細(xì)胞介素2一道在體外培養(yǎng)，獲得大量的腫瘤侵潤淋巴細(xì)胞（Tumor Infiltrating Lymphocytes，簡稱TIL），然后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)。第二是在回輸完成后，分次給患者注射大劑量的白細(xì)胞介素2（簡稱IL-2）。 （二）一個(gè)癌癥自愈的特殊病例1968年，作為細(xì)胞免疫治療創(chuàng)始人之一的現(xiàn)美國國家癌癥研究所史蒂文·羅森伯格（Steven A. Rosenberg）醫(yī)生遇到了一個(gè)極其罕見的病例： 羅森伯格當(dāng)時(shí)還是西羅克斯伯里弗吉尼亞州醫(yī)院（West Roxbury VA Hospital）的一名住院醫(yī)。病人的右上腹疼痛難忍，羅森伯格診斷為急性膽囊炎進(jìn)行膽囊切除術(shù)。 但在手術(shù)時(shí)候發(fā)現(xiàn)，病人的腹部有一道很長的手術(shù)疤痕。羅森伯格調(diào)出了他之前的病歷，發(fā)現(xiàn)他12年前曾因患有消化道癌癥在這家醫(yī)院進(jìn)行過手術(shù)，而且手術(shù)時(shí)癌癥就已經(jīng)轉(zhuǎn)移到肝臟上。病歷中寫道，醫(yī)生雖然能夠?qū)⒁恍┐蟮哪[瘤切除，但對小的轉(zhuǎn)移灶卻無能為力。當(dāng)時(shí)醫(yī)生大概是覺得病人的生存期已經(jīng)不會(huì)很長了，因此建議病人出院回家，享受生命的最后時(shí)光。 美國國立癌癥研究院史蒂文·羅森博格（Steven Rosenberg） 然而讓羅森伯格意外的是，當(dāng)他翻開病歷的下一頁，他發(fā)現(xiàn)這位病人在三個(gè)月后再一次來到了這家醫(yī)院就診，接下來的一次是六個(gè)月之后。病歷中寫著，一年以后這位病人已經(jīng)能重返工作崗位了。 羅森伯格覺得他對此只有兩種解釋。一是醫(yī)生診斷錯(cuò)誤，也就是說這位病人并不是癌癥患者，雖然存在這種可能性，但是概率并不高。而第二種可能是病人的癌癥經(jīng)歷了自發(fā)緩解過程而痊愈了。 羅森伯格檢查了病人的原始病理報(bào)告以及組織樣本，排除了第一種可能。唯一的解釋只能是病人經(jīng)歷了自發(fā)緩解過程。 他堅(jiān)信人體免疫反應(yīng)能夠?qū)鼓[瘤，并因此迷上了癌癥及免疫學(xué)。他認(rèn)為，在所有從外周血提取的T細(xì)胞中，總有那么幾個(gè)能夠識別腫瘤細(xì)胞。如果能夠擴(kuò)增這類細(xì)胞的話，將可能有效的攻擊腫瘤細(xì)胞。 恰好此時(shí)Robert Gallo實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素2能刺激T細(xì)胞的增殖。 于是，羅森伯格使用白細(xì)胞介素2刺激過的T細(xì)胞或直接給患者體內(nèi)注射白細(xì)胞介素2兩種策略治療腫瘤患者。 遺憾的是，治療不但沒有成功，甚至把每位接受治療的患者都送進(jìn)了重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）。 （三）67號病人與白細(xì)胞介素2即便如此，羅森伯格并沒有放棄，他不斷的嘗試，不斷的失敗，直到遇到了一位患有黑色素瘤的67位病人琳達(dá)·泰勒（Linda Taylor）。 這是1984年，在美國海軍服役的琳達(dá)·泰勒來到美國國家癌癥研究院，尋求治療她所罹患的晚期轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤的方法。在那里羅森伯格接待了她。在分離了一部分Taylor的淋巴細(xì)胞后，研究人員將大劑量的白細(xì)胞介素2用于刺激淋巴細(xì)胞，并把得到的淋巴因子活化殺傷細(xì)胞（ 史蒂文·羅森博格（Steven Rosenberg）和治愈后的琳達(dá)·泰勒（Linda Taylor） 泰勒以及其他的一些人的成功治療，使羅森伯格以及白細(xì)胞介素2療法登上了各大新聞的頭條。 之后羅森伯格將數(shù)據(jù)發(fā)表了。但后來人們卻發(fā)現(xiàn)該療法的作用其實(shí)沒那么大，因?yàn)樵摨煼ㄖ荒軌驅(qū)苌僖徊糠值暮谏亓鲆约澳I癌患者起效。 在這之后，羅森伯格的實(shí)驗(yàn)室開始嘗試從手術(shù)切除的腫瘤中提取其中浸潤的淋巴細(xì)胞 (這類細(xì)胞被稱為tumor-infiltrating lymphocytes)，并嘗試在體外擴(kuò)增后回輸?shù)讲∪说捏w內(nèi)，并同時(shí)使用白細(xì)胞介素2進(jìn)行治療。 （四）白細(xì)胞介素2的作用上世紀(jì)80年代，現(xiàn)代免疫學(xué)進(jìn)入興盛期。那時(shí)，人類發(fā)現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的很多有效成分，比如白細(xì)胞介素2。白細(xì)胞介素2是人體免疫細(xì)胞T細(xì)胞的一種很重要的生長因子，T淋巴細(xì)胞一旦跟它接觸，就能快速生長、繁殖。由于T淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)對抗病毒腫瘤的一種很重要的成分，而白細(xì)胞介素2又能促進(jìn)淋巴細(xì)胞的生長，于是研究者們開始暢想白細(xì)胞介素2是不是有可能用來治療癌癥，答案是肯定的。 在此思路之下，白細(xì)胞介素2被開發(fā)成一種治療癌癥的藥，醫(yī)生將其輸入病人的身體里，通過激活病人的免疫系統(tǒng)來對抗腫瘤。這就是上世紀(jì)80年代早期的癌癥免疫治療。 隨著時(shí)間的推進(jìn)，研究人員又進(jìn)行了新的設(shè)想——既然白細(xì)胞介素2能夠促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的快速增長，那么在體外培養(yǎng)增殖起來的淋巴細(xì)胞能不能用來抗腫瘤呢？當(dāng)然可以，最早的免疫細(xì)胞過繼回輸技術(shù)由此誕生了。 白細(xì)胞介素2在這里起什么作用呢？這是因?yàn)槟[瘤侵潤淋巴細(xì)胞屬于已經(jīng)被激活的效應(yīng)性T細(xì)胞，T細(xì)胞被激活后原先位于細(xì)胞表面的低親和性的白細(xì)胞介素2受體（Interleukin-2 Receptor，簡稱白細(xì)胞介素2R）會(huì)變成高親和性受體，這個(gè)受體與白細(xì)胞介素2結(jié)合后會(huì)使效應(yīng)性T細(xì)胞的殺傷力增大，增殖能力也變得更強(qiáng)。 這就是第一代癌細(xì)胞免疫治療，即LAK細(xì)胞療法（又稱免疫刺激性細(xì)胞因子療法）。 LAK細(xì)胞療法開創(chuàng)了細(xì)胞因子和細(xì)胞過繼免疫治療的先河，給腫瘤免疫治療帶來一線曙光。 （五）LAK療法的臨床應(yīng)用1984年11月Rosenberg研究組經(jīng)美國食品和藥品檢驗(yàn)局（Us Food and Drug Administration,FDA）批準(zhǔn)下，首次應(yīng)用白細(xì)胞介素2與LAK協(xié)同治療25例腎細(xì)胞癌、黑素瘤、肺癌、結(jié)腸癌等腫瘤患者。治療用LAK細(xì)胞數(shù)量在0.6-18.4*1010，白細(xì)胞介素2用量2.8*105-3.32*106U/kg。其中11例腫瘤縮小超過50%，1例黑素瘤完全消退。1988年該研究組總結(jié)了白細(xì)胞介素2與LAK細(xì)胞協(xié)同治療222例腫瘤患者，其中16例患者腫瘤轉(zhuǎn)移灶完全消退，26例患者腫瘤消退50%以上，該療法對轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌、黑素瘤、結(jié)腸癌和非何杰金氏淋巴瘤患者的療效較顯著。有報(bào)道乳腺癌、膀胱癌局部應(yīng)用白細(xì)胞介素2進(jìn)行治療也獲得明顯療效。 由于白細(xì)胞介素2用量大，在治療過程中可出現(xiàn)毒副反應(yīng)，最常見和最嚴(yán)重的毒副作用是出現(xiàn)毛細(xì)血管滲漏綜合征（capillary leak syndrome,CLS），主要表現(xiàn)為全身性水腫和多器官功能失調(diào)，可引起胸腹腔積液、肺間質(zhì)水腫和充血性心力衰竭。引起CLS的機(jī)理可能與內(nèi)皮細(xì)胞損傷和產(chǎn)生血管活性物質(zhì)有關(guān)。 （六）LAK療法在臨床應(yīng)用中的局限性嚴(yán)格來說，LAK細(xì)胞并非是一個(gè)獨(dú)立的淋巴群或亞群，而是自然殺傷細(xì)胞（NK）或T細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，在高劑量白細(xì)胞介素2等細(xì)胞因子誘導(dǎo)下成為能夠殺傷NK不敏感腫瘤細(xì)胞的殺傷細(xì)胞，稱為淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（lymphokine activated killer cells,LAK）。但由于LAK細(xì)胞沒有靶向性，回輸后的細(xì)胞殺傷作用不能完全發(fā)揮在癌細(xì)胞上，治療有效率很低。這就需要大量的LAK細(xì)胞才能取得療效，而腫瘤患者難以獲得足夠數(shù)量的LAK細(xì)胞。 為了保持這些細(xì)胞的活性，需要混合大量的細(xì)胞因子進(jìn)行回輸，雖然消滅了部分癌細(xì)胞，但也會(huì)對患者身體造成嚴(yán)重?fù)p傷。比如白細(xì)胞介素2在激活效應(yīng)細(xì)胞的同時(shí)，還會(huì)導(dǎo)致效應(yīng)細(xì)胞出現(xiàn)活化誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡（activation-induced cell death，簡稱AICD），導(dǎo)致大量的效應(yīng)細(xì)胞死亡而影響療效，因此該方法效果有限。 另外，當(dāng)年基因測序、體外培養(yǎng)都是既費(fèi)時(shí)又費(fèi)力還費(fèi)錢的事情，幾乎無法在臨床上推廣，只能在實(shí)驗(yàn)室里做研究，所以，臨床上不能說是很成功。就連羅森博格本人也承認(rèn)其在臨床應(yīng)用中存在局限性。時(shí)間久了，研究人員對LAK療法的熱情降低，堅(jiān)持進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人越來越少，臨床現(xiàn)在比較少用。 不甘放棄的研究者在LAK細(xì)胞療法的基礎(chǔ)上進(jìn)一步思考，他們認(rèn)為T細(xì)胞抗腫瘤理論上是沒有問題的，但是效果為什么不好呢？是不是T細(xì)胞營養(yǎng)不夠？除了白細(xì)胞介素2還要加點(diǎn)其他的東西？ 有時(shí)候醫(yī)學(xué)的進(jìn)步就依賴于這樣天馬行空的推想，很快“淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）”療法的升級版“細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）療法”誕生了。 在此之后的近40年來，歷史也見證了免疫細(xì)胞療法從第一代的LAK療法，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷性細(xì)胞（CIK）療法、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）療法、抗原特異性的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）療法到第五代嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）療法和腫瘤特異性T細(xì)胞受體基因工程細(xì)胞（TCR-T）療法的技術(shù)變革。有關(guān)內(nèi)容，將在后續(xù)的連載中一一介紹。 本期結(jié)束，未完待續(xù)。
故事很精彩，內(nèi)容很豐富。 |
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