細胞水平的細胞增殖是生物醫(yī)學領域非常重要的表型，對細胞增殖的檢測是檢驗藥物對腫瘤細胞影響的zui主要檢測手段。作為細胞水平檢測增殖現象的傳統(tǒng)方法，cck8比色法，Edu細胞增殖檢測在細胞增殖檢測中被廣泛應用。

一、傳統(tǒng)的腫瘤治療方法

1.外科手術治療

2.放射線治療

3.化學藥物治療

眾所周知，化療會產生很多不良反應，比如：骨髓抑制(血細胞減少)、胃腸道反應、脫發(fā)、發(fā)熱、皮疹、心臟毒性、肝臟毒性、神經毒性、泌尿道毒性、局部靜脈炎、致畸、致突變、致癌等等。那么持續(xù)不斷地尋找更好的抗腫瘤藥物勢在必行。

天然產物在新藥及新藥先導化合物的發(fā)現中起著不可替代的作用，是結構新穎和作用獨特的抗腫瘤化合物的重要來源。美國國立癌癥研究所(NCI)從1955年開始從天然產物中篩選抗腫瘤藥物。目前世界上被批準廣泛使用的抗腫瘤藥物中,50 %以上來源于天然產物。那么問題來了~

如何進行抗腫瘤藥物的篩選？ 以及主要用到哪些實驗方法？

實際上，抗腫瘤藥物的篩選體系復雜，涉及到宏觀到微觀水平的一系列實驗。在這里小編，就簡要梳理一下抗腫瘤篩選的關鍵流程吧：

二、動物水平的篩選流程：

三、細胞水平的篩選

①抑制腫瘤細胞增殖實驗

②誘導腫瘤細胞分化實驗

③誘導腫瘤細胞凋亡實驗

④抗腫瘤血管生成實驗

⑤腫瘤多藥耐藥性逆轉實驗

⑥抗腫瘤侵襲和轉移實驗

⑦誘導腫瘤細胞自噬實驗

四、抑制腫瘤細胞增殖實驗

細胞水平檢測增殖現象的傳統(tǒng)方法主要有：1）cck8比色法；2）Edu細胞增殖檢測；

1）cck8比色法

CCK8是基于WST-8的一種細胞增殖檢測方法，WST-8是一種水溶性四唑鹽，常用于評估細胞的代謝活性。在中性pH值及中間電子受體存在的情況下，被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的藍/紫色甲臜產物（formazan）。生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比。用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。

2）Edu細胞增殖檢測

如果你需要獲取更直觀和準確的細胞增殖數據，那么就用Edu細胞增殖檢測法。EdU細胞增殖檢測可以直接并準確地檢測出新DNA的合成。這種檢測不僅能夠測定單個細胞的增殖，還可以通過任何平臺檢測出細胞、組織或整個有機體中的增殖細胞。EdU細胞增殖方法簡單，靈敏，方便，快速，準確，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標記，以檢測細胞其他性狀特征，是細胞增殖檢測的zui佳選擇。

Hela細胞Edu細胞增殖檢測結果，藍色熒光為DAPI染色的細胞核，紅色熒光為EdU標記的增殖細胞；（細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光),cat#KTA2031,Abbkine）

文章來源：Abbkine