盡管免疫檢查點(diǎn)抑制劑成功使10%-30%的患者獲得了長期生存，但這類免疫療法對(duì)大多數(shù)癌癥患者仍然無效。近幾年，為免疫檢查點(diǎn)抑制劑尋找“搭檔”以增強(qiáng)其療效已成為癌癥免疫治療領(lǐng)域最熱門的研究方向。

11月11日，最新發(fā)表于Nature雜志上的一項(xiàng)研究中，來自杜克大學(xué)醫(yī)學(xué)中心的一個(gè)研究團(tuán)隊(duì)證實(shí)，抑制調(diào)控膽固醇代謝的關(guān)鍵蛋白PCSK9能夠通過一種不依賴于PCSK9膽固醇調(diào)節(jié)功能的機(jī)制，提高腫瘤對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑的響應(yīng)。利用CRISPR技術(shù)刪除小鼠癌細(xì)胞中的PCSK9基因，會(huì)以依賴細(xì)胞毒性T細(xì)胞的方式顯著減弱或阻止癌細(xì)胞在小鼠中的生長。刪除PCSK9基因也大大增強(qiáng)了PD-1抗體的療效。此外，研究證實(shí)，在癌癥小鼠模型中，已被批準(zhǔn)上市的PCSK9中和抗體與PD-1抗體在抑制腫瘤生長方面產(chǎn)生了協(xié)同作用。

據(jù)了解，這項(xiàng)新研究是建立在杜克大學(xué)醫(yī)學(xué)中心Chuan-YuanLi教授及其同事先前研究的基礎(chǔ)上。他們?cè)l(fā)現(xiàn)，降低血液膽固醇似乎可以改善癌癥免疫療法?？紤]到PCSK9蛋白是血清膽固醇水平的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，Li教授團(tuán)隊(duì)想知道，PCSK9蛋白是否參與調(diào)節(jié)腫瘤對(duì)免疫治療的反應(yīng)。

為了評(píng)估PCSK9對(duì)腫瘤生長的影響，研究人員使用CRISPR-Cas9技術(shù)在4種惡性小鼠癌細(xì)胞系(B16F10、4T1、MC38和CT26)中敲除了PCSK9基因。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雖然敲除PCSK9并不會(huì)改變腫瘤細(xì)胞的形態(tài)或體外生長速率，但將PCSK9缺陷癌細(xì)胞接種到同源小鼠宿主中時(shí)，與對(duì)照組相比，其形成腫瘤的能力明顯減弱。

為了確定敲除PCSK9削弱腫瘤生長與免疫系統(tǒng)相關(guān)，研究小組將PCSK9缺陷腫瘤細(xì)胞移植到免疫缺陷小鼠（這類小鼠缺乏T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞）中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PCSK9缺陷對(duì)腫瘤生長沒有影響。

由于PCSK9通過促進(jìn)低密度脂蛋白受體（low-density-lipoprotein receptor，LDLR）的溶酶體降解來調(diào)節(jié)膽固醇水平，研究也調(diào)查了是否LDLR參與調(diào)節(jié)小鼠的腫瘤形成。結(jié)果顯示，PCSK9缺陷導(dǎo)致的腫瘤生長衰減不受宿主LDLR狀態(tài)或膽固醇水平的影響。

為了評(píng)估PCSK9缺陷是否能夠與免疫檢查點(diǎn)阻斷療法協(xié)同起作用，科學(xué)家們?cè)诮臃NPCSK9缺陷的B16F10、MC38、4T1或CT26腫瘤細(xì)胞的同源小鼠中使用了小鼠抗PD-1免疫檢查點(diǎn)抑制劑。結(jié)果顯示，在所有4種模型中，PD-1抗體與PCSK9缺陷均能協(xié)同抑制腫瘤生長。

接著，Li教授團(tuán)隊(duì)調(diào)查了已被批準(zhǔn)用于治療高脂血癥的兩種PCSK9中和抗體evolocumab或alirocumab能否與PD-1抗體產(chǎn)生協(xié)同作用。這兩款藥物均已被證實(shí)可有效降低小鼠體內(nèi)的膽固醇。研究結(jié)果表明，雖然PCSK9抗體單藥治療也可延緩MC38腫瘤的生長，但當(dāng)與PD-1抗體聯(lián)合使用時(shí)，效果顯著提高，一些小鼠實(shí)現(xiàn)了長期生存。

研究還評(píng)估了是否PCSK9抗體在對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑產(chǎn)生耐藥的腫瘤中也能起作用。通過3輪體內(nèi)/體外篩選，研究人員建立了對(duì)PD-1抗體耐藥的MC38R結(jié)腸癌模型，并用PD-1抗體和/或evolocumab進(jìn)行治療。結(jié)果顯示，對(duì)于MC38R腫瘤，evolocumab單藥治療或與抗PD-1療法聯(lián)合都顯示出了抗腫瘤活性。

進(jìn)一步的研究顯示，通過刪除基因或使用PCSK9抗體抑制PCSK9可增加腫瘤細(xì)胞表面主要組織相容性復(fù)合體I類(MHC I)分子的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞毒性T細(xì)胞向腫瘤內(nèi)的浸潤。機(jī)制方面，研究發(fā)現(xiàn)，PCSK9可以通過與MHC I類分子進(jìn)行物理作用，并促進(jìn)其在溶酶體中的重新定位和降解，從而阻斷MHC I類分子在細(xì)胞表面的循環(huán)利用。而正常情況下，細(xì)胞毒性T細(xì)胞表面T細(xì)胞受體（TCR）對(duì)腫瘤抗原的識(shí)別依賴于癌細(xì)胞表面上MHC-I類分子對(duì)抗原的呈遞。越來越的研究顯示，MHC分子失去呈遞腫瘤抗原的能力是癌細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)攻擊的一種解釋。

科學(xué)家們認(rèn)為，該研究揭示了PCSK9在調(diào)節(jié)細(xì)胞表面MHC I類分子水平，從而影響瘤內(nèi)免疫浸潤方面的一種重要作用，這種全新的機(jī)制具有巨大的轉(zhuǎn)化潛力。研究結(jié)果表明，抑制PCSK9是增強(qiáng)免疫檢查點(diǎn)抑制劑療效的一種有前途的方法。中和PCSK9可能能夠促進(jìn)T細(xì)胞的瘤內(nèi)浸潤，從而使腫瘤對(duì)免疫檢查點(diǎn)治療更敏感。該研究為未來在癌癥患者中開展調(diào)查“PCSK9抑制劑+免疫檢查點(diǎn)抑制劑”這種聯(lián)合治療策略的臨床試驗(yàn)提供了令人信服的理論依據(jù)。

“這是一項(xiàng)重要的發(fā)現(xiàn)。我們的研究證實(shí)，通過抑制PCSK9蛋白的作用，腫瘤生長變得緩慢。我們已經(jīng)在多種不同的小鼠腫瘤模型中進(jìn)行了測試，且在黑色素瘤、乳腺癌和結(jié)腸癌模型中均觀察到了有效的抗癌作用。此外，對(duì)先前發(fā)表的人類數(shù)據(jù)的分析表明，PCSK9蛋白也可能是其他幾種癌癥一個(gè)很好的靶點(diǎn)，包括肝癌、肺癌和腎癌。下一步，我們將開展臨床研究，調(diào)查PCSK9抑制劑（如evolocumab或alirocumab）聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑的治療潛力?！盠i教授總結(jié)道。

PCSK9靶向藥物是近幾年醫(yī)藥研發(fā)領(lǐng)域的熱門品種之一，作為新一代降脂藥物備受關(guān)注。PCSK9調(diào)節(jié)膽固醇水平的能力是基于其能夠下調(diào)細(xì)胞表面LDLR的水平，從而降低膽固醇代謝（PCSK9可通過重定向LDLR，使之進(jìn)入溶酶體降解途徑，從而抑制LDLR在細(xì)胞表面的循環(huán)利用）。而PCSK9靶向藥物可通過抑制PCSK9與LDL受體的結(jié)合，從而增加肝細(xì)胞表面上的可用LDL受體數(shù)量以清除LDL，從而降低血液中的低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平（LDL-C升高是心血管疾病的重要發(fā)病因素之一）。

表1 部分獲批上市及處于臨床開發(fā)階段的PCSK9靶向藥物

據(jù)NextPharma數(shù)據(jù)庫顯示，除了獲批上市的 依洛尤單抗（evolocumab）和阿利西尤單抗（alirocumab），目前全球有多款PCSK9靶向藥物處于臨床開發(fā)階段。國內(nèi)有多家公司的項(xiàng)目處于II/III期臨床，如君實(shí)生物的ongericimab（抗體）、信達(dá)生物的tafolecimab（抗體）、康融東方的ebronucimab（抗體）、西威埃醫(yī)藥的CVI-LM001（小分子）、恒瑞醫(yī)藥的SHR1209（抗體）。值得一提的是，君實(shí)生物、信達(dá)生物以及恒瑞醫(yī)藥均有PD-1抗體獲批上市。這項(xiàng)最新的研究成果或許會(huì)成為他們開發(fā)“PD-1抗體+ PCSK9抗體”這一全新聯(lián)合治療方案的重要參考。