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上皮向間充質(zhì)轉(zhuǎn)變是一些癌細胞從上皮表型轉(zhuǎn)化為間充質(zhì)細胞的主要過程，已被證明可促進癌癥患者的化學(xué)耐藥性和/或轉(zhuǎn)移。
近期，日本的一研究團隊鑒定出了 CD45/CD326 雙陽性癌細胞，發(fā)現(xiàn)其表面標(biāo)記物可以闡明非小細胞肺癌（NSCLC）細胞的表型異質(zhì)性，并確定出一個新的亞群，該亞群對 NSCLC 患者和惡性胸腔積液患者的上皮和非上皮細胞表面標(biāo)記物呈雙重陽性。
（圖源: Clinical Cancer Research 官網(wǎng)截圖） 非小細胞肺癌（NSCLC）約占肺癌的 80%，許多研究表明癌細胞具有異質(zhì)性。癌癥患者的惡性積液被認為是不良的預(yù)后征兆，腫瘤異質(zhì)性也是患者預(yù)后的重要臨床指標(biāo)。
例如，胃癌患者腹水中較高的腫瘤細胞比例可導(dǎo)致患者預(yù)后較差，且已知癌癥中的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）與治療耐藥性、侵襲性和轉(zhuǎn)移有關(guān)。 研究人員們在 2010 年至 2017 年之間收集了 39 例 NSCLC 患者的樣品，其中 21 例為切下來 2-3 小時內(nèi)收集的新鮮肺癌的腫瘤組織，18 例為惡性胸腔積液樣品，這些樣本中存在不同百分比的 CD45 pos/CD326 pos 細胞。
通過 FACS 確認 CD45 pos/CD326 pos 雙陽性癌細胞研究人員們通過 FACS 檢測到樣品中 CD45 pos/CD326 pos 單細胞的比例很大，因此猜測這些單細胞是 EMT 的最可能的候選者，最終在實體癌組織和惡性胸腔積液中均檢測到了，并且發(fā)現(xiàn) CD45 pos/CD326 pos 細胞是 CD45/CD326 雙陽性惡性細胞。
將健康的中年男性志愿者中提取的血清樣本用作對照，在其中未檢測到 CD45 / CD326 DPC。在實體瘤中，CD45 / CD326 DPC 群體的平均大小為 5.5%（0.4%–17.9%），而在惡性胸腔積液中，CD45 / CD326 DPC 人群的平均大小則高出近 7 倍，為 34.5%（1.1%–96.7%）。同時，通過熒光顯微鏡和巴氏染色確認 CD45 / CD326 雙陽性癌細胞。
CD45/CD326 DPC 中 EGFR 基因突變的確認
研究人員們將 EGFR 突變用作癌細胞評估的標(biāo)志物，并監(jiān)測了其在每個分析樣品中的存在，發(fā)現(xiàn) CD45 pos/CD326 pos 細胞和 CD45 neg/CD326 pos（僅上皮細胞單個陽性）細胞具有與每個相應(yīng)原發(fā)腫瘤相同的突變，這些表明雙陽性細胞起源于癌細胞。
在所有 18 例胸腔積液患者中分析了 EGFR 基因的突變，有 5 個具有致病突變，所有突變均位于第 19 外顯子或第 20 外顯子，并將其中 3 例用 PCR 擴增了靶突變區(qū)域，從遺傳學(xué)角度確認 CD45 / CD326 DPC 是惡性的。
來自 CD45 pos/CD326 pos 的每個樣品（雙陽性）細胞在其相應(yīng)患者中顯示出相同的突變。研究人員們還進行了核苷酸測序分析，CD326 pos 組 9 個堿基插入其中，而 CD326 neg 組沒有這種突變。
CD45 pos/CD326 pos 表達與患者生存不良相關(guān)
研究人員探究 18 例胸腔積液患者中 CD45 pos/ CD326 pos 細胞對患者預(yù)后的影響，分析了 CD326 pos 細胞群中 CD45 pos/CD326 pos 細胞的比例，發(fā)現(xiàn)患者的 CD45 pos /CD326 pos 細胞比例較低有較好的預(yù)后。
在該隊列研究中，有 2 名患者的 CD45 pos/ CD326 pos 細胞超過 90%，18 名患者中有 4 名（22%）仍然活著，這 4 名幸存者中有 3 名患有 EGFR 突變并正在用酪氨酸激酶抑制劑（TKI）治療；剩余的幸存者正在接受 PD-1 治療。
1. 首次證明 NSCLC 患者的實體肺腫瘤組織和胸腔積液中都存在 CD45/CD326 雙陽性癌細胞。2. 將 EGFR 突變用作癌細胞評估的標(biāo)志物，證實雙陽性細胞起源于癌細胞，且發(fā)現(xiàn)患者組織內(nèi)的腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。3.NSCLC 患者的原發(fā)腫瘤和惡性胸腔積液中 CD45/CD326 DPC 的濃度范圍很廣，高百分比的 CD45 / CD326 DPC 是重要的不良預(yù)后因素。4. 目前通過液體活檢檢測 CD45/CD326 DPC 在技術(shù)上并不容易，使用非癌性樣本（例如來自非惡性疾病患者的胸腔積液）作為對照的其他研究可以為將來的研究提供有價值的信息。5. 原發(fā)性實體瘤組織和胸腔積液，但這些患者的轉(zhuǎn)移性腫瘤組織和血清尚不可用，有必要使用轉(zhuǎn)移灶和/或患者血清中的細胞進行進一步研究，以驗證關(guān)于 CD45/CD326 DPC 對轉(zhuǎn)移的貢獻的假設(shè)。
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