一、概述

亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）是甲硫氨酸-葉酸代謝中的關(guān)鍵酶。該酶將5,10-亞甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)換為5-甲基四氫葉酸。一方面，5-甲基四氫葉酸作為細(xì)胞內(nèi)一碳單位載體參與核酸合成及甲基化，另一方面其作為甲基的供體參與同型半胱氨酸（Hcy）的代謝，維持Hcy正常的血漿水平（圖1）。

圖1. 亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR與葉酸代謝

MTHFR基因的多個(gè)位點(diǎn)在人群中具有多態(tài)性，其中與功能和疾病最為相關(guān)的是C677T位點(diǎn)多態(tài)性。在MTHFR基因第677個(gè)核苷酸位置，其堿基可發(fā)生胞嘧啶（C）向胸腺嘧啶（T）的突變，MTHFR酶的活性逐級(jí)降低（表1），引起Hcy在人體內(nèi)不同程度的蓄積，表現(xiàn)為血漿水平升高。

表1. C677T位點(diǎn)突變對(duì)亞甲基四氫葉酸還原酶活性的影響

MTHFR基因型變異是導(dǎo)致我國(guó)人群腦卒中高發(fā)最主要的遺傳危險(xiǎn)因素，主要是因?yàn)楦?/span>Hcy與高血壓對(duì)于心血管疾病的發(fā)生具有協(xié)同作用，且我國(guó)高血壓患者中75%是H型高血壓。血漿Hcy水平每增加5μmol/L，中風(fēng)風(fēng)險(xiǎn)增加59%，缺血性心臟病風(fēng)險(xiǎn)增加33%，而H型高血壓患者的卒中風(fēng)險(xiǎn)比一般人高出11-28倍?！?/span>H型高血壓專家共識(shí)》認(rèn)為，MTHFR（C677T）的TT純合突變型是導(dǎo)致H型高血壓的重要遺傳因素。

此外，大量研究表明MTHFR 677C/T基因突變會(huì)導(dǎo)致孕婦體內(nèi)同型半胱氨酸升高，從而導(dǎo)致孕婦早產(chǎn)、低出生體重兒、新生兒神經(jīng)管畸形、唇腭裂等。因此提前檢測(cè)與孕婦早產(chǎn)，新生兒出生缺陷相關(guān)基因，提前進(jìn)行干預(yù)治療，從而降低新生兒出生缺陷以及孕婦早產(chǎn)，對(duì)提高我國(guó)人口素質(zhì)，降低國(guó)家和家庭負(fù)擔(dān)方面有著重要的意義。

二、檢測(cè)方法

本實(shí)驗(yàn)室采用“熒光PCR法”進(jìn)行MTHFR C677T序列測(cè)定。使用熒光PCR探針與DNA序列結(jié)合，根據(jù)產(chǎn)生的熒光信號(hào)判斷MTHFR C677T的基因型。與傳統(tǒng)sanger測(cè)序法相比，該方法操作簡(jiǎn)便、快速，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物無(wú)需開帽處理，避免產(chǎn)物氣溶膠的產(chǎn)生，極大降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，因此廣泛應(yīng)用于基因位點(diǎn)的多態(tài)性檢測(cè)。

三、臨床應(yīng)用

1、重點(diǎn)科室：心內(nèi)科、干部科

MTHFR基因型與血漿Hcy水平共同檢測(cè)，預(yù)測(cè)心腦血管疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，指導(dǎo)個(gè)體化安全有效用藥，精準(zhǔn)防控腦卒中（表2）。主要應(yīng)用于：（1）有心腦血管家族史，精確定位高危人群；（2）高血壓患者，早期預(yù)測(cè)H型高血壓患病風(fēng)險(xiǎn)；（3）H型高血壓患者，明確卒中危險(xiǎn)分層。

表2. 高血壓患者MTHFR基因分型結(jié)合血漿Hcy水平判斷的干預(yù)建議

2、重點(diǎn)科室：婦產(chǎn)科

指導(dǎo)備孕女性或孕婦葉酸補(bǔ)充和高血壓的控制，降低嬰兒出生缺陷和孕婦妊高癥的風(fēng)險(xiǎn)。

3、重點(diǎn)科室：骨腫瘤科、血液科、風(fēng)濕免疫科

甲氨蝶呤（MTX）是一種葉酸抑制劑，有文獻(xiàn)報(bào)道顯示，MTHFR基因TT型的患者使用MTX時(shí)血藥濃度更高，并與肝毒性、黏膜炎有關(guān)，MTHFR基因TT型患者應(yīng)慎重使用MTX或考慮更換其他藥物。MTHFRC677T檢測(cè)對(duì)患者的MTX用藥有一定指導(dǎo)意義。

四、醫(yī)囑項(xiàng)設(shè)置

1、開設(shè)時(shí)間：2018年5月16日

2、醫(yī)囑項(xiàng)設(shè)置：可輸入“亞甲基四氫葉酸”拼音首字母（“yjjsqys”），或 “MTHFR”進(jìn)行檢索。新街口和回龍觀院區(qū)均可開醫(yī)囑，由檢驗(yàn)科統(tǒng)一配送標(biāo)本。

3、標(biāo)本留?。红o脈抽取2ml全血（無(wú)須空腹），于EDTA抗凝管（紫帽），工作日送檢，

4、報(bào)告發(fā)送：5-7個(gè)工作日發(fā)報(bào)告，門診病人需至檢驗(yàn)科“標(biāo)本分理處”領(lǐng)取完整A4報(bào)告單。

5、聯(lián)系電話：7037（檢驗(yàn)科新街口院區(qū)PCR實(shí)驗(yàn)室）

6、其他注意事項(xiàng)：基因型檢測(cè)結(jié)果終生不變，同一病人相同基因位點(diǎn)不必重復(fù)檢測(cè)。

五、主要參考文獻(xiàn)：

1. Homocysteine and cardiovascular disease:evidence on causality from a meta-analysis.JAMA,1997, 277(22): 1775-1781.

2. Efficacy of Folic Acid Therapy in PrimaryPrevention of Stroke Among Adults With Hypertensionin China. JAMA.CSPPT.2015

3. 葉酸在妊娠期的研究進(jìn)展. 中國(guó)當(dāng)代醫(yī)學(xué), 2012,19(30):22-23.

4. The role of the MTHFR C677T polymorphismin methotrexate-induced toxicity in pediatric osteosarcoma patients. Pharmacogenomics.2017 Jun;18(8):787-795.