一 細(xì)菌的結(jié)構(gòu)與生理

【01】細(xì)菌形態(tài)：具有細(xì)胞壁和核質(zhì)的單細(xì)胞原核細(xì)胞型微生物。無成形的細(xì)胞核，無完整的細(xì)胞器。以微米為測量單位。在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，肉眼可見菌體集落。

【02】細(xì)菌結(jié)構(gòu)

（一）細(xì)胞壁：

1、肽聚糖：為聚糖骨架；原核生物細(xì)胞特有。

2、磷壁酸：G+菌特有；其抗原性較強(qiáng)：黏附宿主細(xì)胞。 

3、外膜： 外膜蛋白：脂蛋白、微孔蛋白。

脂質(zhì)雙層：脂多糖：類脂A：內(nèi)毒素成分。

核心多糖：具有屬特異性。

特異性多糖：具有種型特異性。

4、 周漿間隙：外膜與細(xì)胞膜之間，可獲得營養(yǎng)，解除病毒。  

（二)細(xì)胞膜 ：

定義：為脂質(zhì)雙層，并鑲嵌有特殊功能的載體蛋白酶類；不含膽固醇。  

功能：物質(zhì)交換、分泌胞外酶、產(chǎn)生與利用能量有關(guān)、細(xì)胞生物合成的場所。

（三）細(xì)胞質(zhì)：

成分：水、蛋白質(zhì)、脂類、核酸、少量無機(jī)鹽、核糖體、質(zhì)粒。(為超微結(jié)構(gòu))

核糖體：由RNA和蛋白質(zhì)組成；是蛋白質(zhì)合成場所。

質(zhì)粒：定義：細(xì)胞染色體外的遺傳物質(zhì)，為雙股DNA分子。

包括：F質(zhì)粒：決定細(xì)菌的致育性。

R質(zhì)粒：決定耐藥性。

毒力質(zhì)粒：決定致病性。

（四）核體：

染色體(裸露的雙鏈DNA)

【03】G+菌：革蘭氏染色為紫色；G-菌：革蘭氏染色為紅色。

【04】細(xì)胞壁的功能：維持固有形態(tài)、物質(zhì)交換、攜帶有抗原決定簇與致病性有關(guān)。

【05】細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)：

⑴莢膜：

①為黏液樣物質(zhì)；

②為多糖或多肽或透明質(zhì)酸奶；

③在營養(yǎng)品豐富時(shí)才形成；

④能抵抗吞噬；

⑤有特異性抗氧。

⑵鞭毛：

①細(xì)長波浪狀物業(yè)；

②成分為蛋白質(zhì)；

③能運(yùn)行(沙門菌)；

④有特異的H抗氧;

⑤與黏附有關(guān)。

⑶菌毛：

①普通菌毛：有黏附功能的；

②性菌毛：F菌毛。成分為菌毛蛋白（pillin）；有良好的抗生素抗性。

⑷芽孢：定義：一定條件下胞質(zhì)脫水濃縮形成；有多層膜包裹；通透性低；有完整核質(zhì)和酶系統(tǒng)；代謝靜止；不能分裂繁殖。是抵抗不良環(huán)境的特殊形成。滅活方法：160℃干熱滅菌或高壓蒸氣滅菌。

【06】細(xì)菌染色方法

①革蘭氏染色法的程序：草酸銨結(jié)晶紫染色1min→碘液染1min→95％醇脫色30s→碳酸復(fù)紅1min、

意義：鑒別細(xì)菌、選擇抗菌藥物。

②瑞氏染色法：將細(xì)菌染成藍(lán)色；組織細(xì)胞的細(xì)胞核染成藍(lán)色；背景和細(xì)胞漿染成紅色。

③抗酸染色法：常用于結(jié)核桿菌、副結(jié)核桿菌的染色(紅色)。

順序是：碳酸復(fù)紅微熱3－5min→3％鹽酸酒精脫色→堿性美蘭復(fù)紅1min、

④特殊染色法：包括抗酸染色法，芽孢、莢膜、鞭毛染色法。

【07】細(xì)菌的生長條件：

①營養(yǎng)物質(zhì)；

②酸堿度(最宜pH為7、2-7、6)；

③溫度(最適為3％)；

④氣體(氧氣、二氧化碳)；

⑤滲透性。

【08】世代時(shí)間：一個(gè)菌體以二分裂方式繁殖為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間。

【09】細(xì)菌的生長曲線分為四個(gè)時(shí)期：

①遲緩期：菌體增大，代謝活躍；分裂遲緩，細(xì)菌數(shù)增加不顯著。

②對數(shù)期：活菌數(shù)對數(shù)直線上升；生物活性典型；對抗生素敏感。

③穩(wěn)定期：新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)平衡；產(chǎn)生芽孢，外毒素等。

④衰亡期：死菌數(shù)超過活菌數(shù)；菌體形態(tài)改變。

【10】細(xì)菌新成代謝的能量由ATP供給。

【11】細(xì)菌生物氧化的類型

①發(fā)酵：以有機(jī)物為受氫體。

②有氧呼吸：以氧氣為受氫體。

③厭氧呼吸：以無機(jī)物硝酸鹽為受氫體。

【12】細(xì)菌合成的代謝產(chǎn)物：

①致熱源：(操作時(shí)嚴(yán)格注意無菌操作)。

②毒素：內(nèi)毒素為G-菌死后釋放，外毒素為G+菌分泌的蛋白質(zhì)。

③侵襲性酶類：透明質(zhì)酸酶(促使細(xì)菌擴(kuò)散)。

④色素：銅綠假單胞菌產(chǎn)綠色色素。

⑤細(xì)菌素：僅對近緣菌株有抗菌作用的蛋白質(zhì)，如：綠膿菌素。

⑥抗生素：多有放線菌和真菌產(chǎn)生。

⑦維生素：大腸桿菌能合成維生素B維生素K。

【13】細(xì)菌的分解代謝試驗(yàn)：

①氧化發(fā)酵試驗(yàn)：大腸桿菌產(chǎn)酸產(chǎn)氣；沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

②氧化酶試驗(yàn)：陽性者為什么紫色。(陽性菌有假單胞菌、氣單胞菌；陰性菌有：腸科桿菌)

③過氧化氫酶試驗(yàn)：陽性者產(chǎn)生氣泡。(陽性：葡萄球菌、微球菌。陰性：鏈球菌。)

④硫化氫試驗(yàn)：產(chǎn)生黑色為陽性(陽性：變形桿菌；陰性：大腸桿菌)

⑤尿素酶試驗(yàn)：陽性者呈紅紫色(陽性：變形桿菌；陰性：沙門菌)

⑥吲哚試驗(yàn)：陽性呈紅色(陽性：大肝桿菌、變形桿菌)

⑦甲基紅試驗(yàn)(MR)：紅色反應(yīng)為陽性(陽性：大腸桿；陰性：產(chǎn)氣桿)

⑧VP試驗(yàn)：陽性呈紅色(陽性：產(chǎn)氣桿菌;陰性：大腸桿菌)

⑨枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)(C)：培養(yǎng)基變深蘭為陽性(陽性：產(chǎn)氣桿菌；陰性：大腸桿菌)

⑩IMVC試驗(yàn)：大腸桿菌++--;產(chǎn)氣桿菌--++

【14】固體培養(yǎng)基中瓊脂含義2％；半固體培養(yǎng)基中瓊脂含量0.5%。

【15】基礎(chǔ)培養(yǎng)基：常用普通肉湯培養(yǎng)基，含蛋白胨、牛肉浸膏、NaCl、水等；常用于糖發(fā)酵試驗(yàn)。

【16】營養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等；常用血瓊脂平板(鏈球菌)。

【17】選擇培養(yǎng)基：麥康凱培養(yǎng)基抑制G+生長，利于用大腸桿菌、沙門菌生長。

【18】鑒別培養(yǎng)基：另加入底物及指示劑，而鑒別細(xì)菌。

【19】厭氧培養(yǎng)基：常用皰肉培養(yǎng)基；即在肉浸液中加入煮過的肉渣，用凡士林封口。

【20】液體培養(yǎng)基生長現(xiàn)象：①混濁生長(葡萄球菌)；②沉淀生長(鏈球菌)；③菌膜生長(枯草桿菌)。

【21】半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象：沿穿刺線生長或穿刺線向四周擴(kuò)散呈放射狀生長。

【22】固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象：平板上劃線后形成菌落；斜面上劃線重疊形成菌苔。

二 細(xì)菌的感染

【01】正常菌體的分布：

①口腔：球菌、乳桿菌、棒狀桿菌；

②胃：乳桿菌、幽門螺桿菌；

③反芻前胃：無芽孢厭氧菌；

④大腸：雙歧，擬桿菌，腸球菌，大腸桿菌，乳桿菌；

⑤鼻、咽：葡萄酒球菌；

⑥喉、扁桃體：甲型鏈球菌，卡他球菌；

⑦陰道：乳桿菌；

⑧尿道口：葡萄球菌，棒狀桿菌；

⑨支氣管、肺：無菌；

【02】正常菌群的生理作用：生物頡頏作用，營養(yǎng)作用，免疫作用。

【03】柯赫法則：是確定某種細(xì)菌是否有具有致病性的主要依據(jù)。

①特定的病原菌應(yīng)在同一疾病中可見，在健康者不存在；

②此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種；

③此病原菌純培養(yǎng)物接種易感動(dòng)物能導(dǎo)致同樣病癥；

④自實(shí)驗(yàn)感染的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)物。

【04】細(xì)菌的毒力因子：

⑴侵襲力

①黏附因子

F1菌毛：無特異性；

F4菌毛K88：黏附豬小腸前段；

F6菌毛987P：黏附豬小腸后段。

②侵襲性酶

透明質(zhì)酸酶、鏈激酶：鏈球菌產(chǎn)生;

膠原酶：梭菌、氣單胞菌產(chǎn)生;

血液凝固酶：致病葡萄菌產(chǎn)生。

③Ⅱ型分泌系統(tǒng)

沙門氏菌、大腸桿菌等具有。

④干擾防御

莢膜：抵抗吞噬；

細(xì)菌表面蛋白：抗吞噬、避免抗體補(bǔ)體作用；

蛋白酶；

細(xì)胞內(nèi)逃逸：如產(chǎn)生過氧化氫，中和吞噬細(xì)胞中的氧自由基。

⑵毒素

①外毒素

由G+及少量G-(如產(chǎn)毒性大腸埃希氏菌)產(chǎn)生；

   0、3%甲醛  刺激      機(jī)體

外毒素→→→→類毒素→→→產(chǎn)生抗毒素；                   

神經(jīng)毒素：包括破傷風(fēng)毒素，肉毒毒素。

②內(nèi)毒素

是G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，當(dāng)細(xì)菌死亡后才游離出來；

產(chǎn)生癥狀：發(fā)熱、毒血癥、休克、內(nèi)凝血、出血。

【05】破傷風(fēng)梭菌及其芽孢必須侵入缺氧的深部創(chuàng)口才能致病。

【06】幾種血癥的區(qū)別

①菌血癥：病原菌侵入血統(tǒng)，但不繁殖。

②毒血癥：病原菌不的入血，但其產(chǎn)生內(nèi)毒素入血，引起癥狀。

③敗血癥：病原菌入血，并繁殖產(chǎn)生毒性物質(zhì)，引起中毒癥狀(高熱、皮膚黏膜淤斑、肝脾腫大)。

④膿毒血癥：化膿性細(xì)菌入血并繁殖，產(chǎn)生新的化膿灶。

【07】藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：

①敏感：用常用劑量時(shí)，該抗菌藥物治療有效。

②中介：指被測菌株的MIC與該抗菌藥物常用劑量所能達(dá)到的血清和組織濃度相近。

③耐藥：指被測菌株不能被該抗菌藥物常用劑量達(dá)到的血液濃度所抑制，臨床治療無效。

三 細(xì)菌感染的診斷

【01】采集樣本的原則：

①嚴(yán)格無菌操作；

②根據(jù)不同疾病或同一疾病不同時(shí)期采集不同的標(biāo)本；

③應(yīng)在使用抗菌藥前采集，且采集時(shí)不得使用消毒劑；

④樣本須新鮮，盡快送檢；

⑤多數(shù)可冷藏運(yùn)輸，糞便樣本常加入甘油緩沖鹽水保存液；

⑥按規(guī)定包裝、冷藏、專人遞送；做好標(biāo)記。

【02】抗體檢測：最好檢測急性期和恢復(fù)雙份血清樣本，后者為前者4倍以上才具診斷價(jià)值。

【03】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的4種主要材料：DNA模板、引物、耐熱DNA聚合酶、脫氧核苷酸。

【04】核酸雜交技術(shù)的設(shè)計(jì)原理：DNA雙螺旋分子的堿基互補(bǔ)原理。

【05】利用生化反應(yīng)對腸道桿菌進(jìn)行鑒定是必不可少的。

四 消毒與滅菌

【01】消毒：指殺滅病原微生物，但不一定能殺死芽孢。

【02】滅菌：指殺滅病原微生物、非病原微生物及其芽孢。

【03】高壓蒸汽滅菌法：應(yīng)用最廣、滅菌效果最好的方法。其條件為103、4kp、121、3℃、維持15-30min、

【04】煮沸法：100℃時(shí)5min可殺死細(xì)菌的繁殖體，1-3h殺死芽孢，加入2%碳酸鈉則沸點(diǎn)升至少105℃

【05】流通蒸汽法：100℃ 30min殺死細(xì)菌的繁殖體，不可殺死芽孢。

【06】巴氏消毒法：主要用于食品消毒，如下65℃維持30min、

【07】熱空氣滅菌法：160℃，2h可殺死芽孢。用于玻璃器皿消毒。

【08】紫外線滅菌：265nm波長的紫外線殺菌能力最強(qiáng)。用于實(shí)驗(yàn)室，養(yǎng)殖場入口的消毒室、手術(shù)室、種蛋等的空氣消毒。

【09】電離輻射滅菌：稱“冷滅菌”，用于一次性醫(yī)用塑料制品消毒。

【10】濾過除菌法：所器具為濾菌器，其孔徑為0、22-0、45um即細(xì)菌不能通過，但病毒、支原體可通過。

【11】紫外線消毒：有效距離不超過2-3m、

【12】消毒劑作用機(jī)制：

①使菌體蛋白變性、凝固(醇、酚、醛)；

②干擾細(xì)菌代謝(酚類)；

③改變細(xì)胞膜通透性(新潔爾滅)。

【13】能殺滅芽孢的消毒劑：氯制劑、過氧化化物、醛類。

【14】影響消毒藥作用的因素：

①濃度、性質(zhì)、作用時(shí)間；

②溫度和酸堿度；

③細(xì)菌種類、數(shù)量狀態(tài)；

④有機(jī)物。